线粒体DNA靶向Dm-dNK自杀基因治疗实体肿瘤

本研究拟采用线粒体信号COXVШ，人工突变C末端的细胞核信号，以逆转录病毒为载体，将高效多底物的果蝇脱氧核苷酸激酶基因（Dm-dNK）定位整和于线粒体DNA中并使之有效表达，利用绿色荧光蛋白GFP及线粒体DNA特异性复染确认其亚细胞表达位点，比较Dm-dNK不同亚细胞水平表达时酶活性，磷酸化核苷酸类似物（癌前药物）能力及其细胞毒性效果，Dm-dNK基因不同亚细胞水平表达，尤其是线粒体表达对旁观者效应的影响，并在体外细胞系水平成功的基础上，完成早期体内动物模型实验，利用线粒体DNA的复制速度远比核DNA慢，因而可以有效减少插入基因失活，突变，甲基化的发生机会，线粒体DNA没有强大的基因修复机制，插入基因的较长时间的稳定表达等特点，尝试以线粒体DNA为新的基因治疗靶向，结合新发现的高效"自杀"基因，获得更有效的肿瘤杀伤效果。试图寻找出另一条肿瘤自杀基因治疗的途径。