基于Notch信号通路探讨补肾填精法对化疗源性卵巢早衰大鼠卵巢生殖干细胞调控的影响

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81674016
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    55.0万
  • 负责人：
    朱玲
  • 依托单位：
    广州中医药大学
  • 学科分类：
    H3111.中医妇科学
  • 结题年份：
    2020
  • 批准年份：
    2016
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2017-01-01 至2020-12-31

项目摘要

Ovarian function is very important in female reproductive physiology in the treatment of intractable premature ovarian failure. The source of chemotherapy of premature ovarian failure in female rats as the carrier, the representative of Bushentianjing side Zuoguiwan treated with estradiol valerate, as positive control, isolation and culture of stem cells on the ovary through two step enzyme digestion and immunomagnetic beads, chemotherapy derived study of ovarian premature ovarian failure rat germ stem regulation the biological characteristics and mechanism of Notch signaling pathway in cells, focusing on Zuoguiwan stem cell proliferation and differentiation of ovarian germ and influence on the regulation of Notch signaling pathway, the mechanism of interpretation of Bushentianjing treatment of chemotherapy of premature ovarian failure, is of great significance to study the aging mechanism, the effective study of ovarian premature ovarian failure the treatment, deepen the "kidney dominating reproduction" connotation.
卵巢功能在女性生殖生理中非常重要，卵巢早衰治疗棘手。以化疗源性卵巢早衰雌性大鼠为载体，采用补肾填精代表方左归丸灌胃治疗，以戊酸雌二醇为阳性对照，通过两步酶消化法和免疫磁珠法对卵巢生殖干细胞分离、培养，研究化疗源性卵巢早衰大鼠卵巢生殖干细胞的生物学特性及Notch信号通路的调控机制，重点研究左归丸对卵巢生殖干细胞增殖、分化的影响及对Notch信号通路调控的影响，阐释补肾填精法治疗化疗源性卵巢早衰的机制，对研究卵巢老化机制、探讨卵巢早衰的有效治疗、深化“肾主生殖”的内涵具有重要的意义。

结项摘要

项目背景：卵巢是女性生殖健康的基础，化疗的性腺毒性可导致卵巢功能衰竭，严重影响女性的生殖健康。研究表明哺乳动物卵巢中存在卵巢生殖干细胞，Notch 信号通路在干细胞增殖、分化和凋亡过程中起关键作用。在临床疗效的基础上，我们前期的研究表明补肾填精法代表方左归丸能有效抑制化疗引起的卵泡凋亡，保护卵巢功能，故提出假设：补肾填精法治疗卵巢早衰的作用可能与其通过Notch 信号通路调控卵巢生殖干细胞干性有关。.主要研究内容：以环磷酰胺制备化疗源性卵巢早衰大鼠模型，研究模型大鼠卵巢生殖干细胞生物学特性；通过离体试验及在体实验研究左归丸对模型大鼠卵巢生殖干细胞的影响；通过CCK8法、免疫荧光法、RT-PCR、western blot等技术检测相关指标，研究Notch信号通路对化疗源性卵巢早衰大鼠卵巢生殖干细胞的调控及左归丸的影响。.重要结果及关键数据：离体实验：所培养细胞为Mvh/BrdU双阳性细胞，表达Dazl和Fragilis，属于生殖系多潜能干细胞。模型鼠卵巢生殖干细胞增殖率降低（p＜0.05）。生殖干细胞中Mvh、Mvh/BrdU及Oct4、SSEA-1蛋白表达较低。生殖干细胞中Oct4、ZP1、ZP2、Notch1和Hes1 的mRNA相对表达量明显降低（p＜0.05）；经左归丸含药血清处理后，卵巢生殖干细胞增殖能力显著增高（p＜0.05），呈时效性与量效性正相关，Oct4、ZP1及Notch1的mRNA相对表达量增加（p＜0.05）。在体实验：模型组卵巢Mvh、Oct4及Dazl的mRNA相对表达量降低（p＜0.05）。Mvh、Oct4、Dazl、ZP2、ZP3、Notch1、Hes1和Hes5蛋白表达均显著降低（p＜0.05）。血清AMH水平显著下降（p＜0.05）。左归丸组卵巢Mvh、Oct4、Dazl、ZP1、ZP2及ZP3的mRNA相对表达量均升高（p＜0.05）；Mvh、Oct4、ZP3、Notch1、Hes1及Hes5蛋白的表达亦升高（p＜0.05）。血清AMH水平显著升高（p＜0.05）。.科学意义：补肾填精代表方左归丸通过促进卵巢生殖干细胞的干性，改善卵巢功能；并通过上调Notch信号通路促进卵巢生殖干细胞干性的维持与表达，治疗卵巢早衰。揭示了补肾填精法治疗卵巢早衰、卵巢老化的重要机制，深化了“肾主藏精”和“肾主生殖”的深刻内涵。

项目成果

期刊论文数量（4）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
基于网络药理学探讨左归丸治疗早发性卵巢功能不全机制
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2020
  • 期刊：
    辽宁中医药大学学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    曾丽华;朱玲;叶金飞;李茂飞
  • 通讯作者：
    李茂飞
Zuogui Pills inhibit mitochondria-dependent apoptosis of follicles in a rat model of premature ovarian failure
左归丸抑制卵巢早衰大鼠模型线粒体依赖性卵泡凋亡
  • DOI：
    10.1016/j.jep.2019.111855
  • 发表时间：
    2019-06-28
  • 期刊：
    JOURNAL OF ETHNOPHARMACOLOGY
  • 影响因子：
    5.4
  • 作者：
    Peng, Huijuan;Zeng, Lihua;Geng, Hongling
  • 通讯作者：
    Geng, Hongling
环磷酰胺辅助化疗后乳腺癌患者卵巢功能损伤情况及中医证候特征研究
  • DOI：
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  • 发表时间：
    2019
  • 期刊：
    广州中医药大学学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    郭淑敏;周秀丽;朱玲
  • 通讯作者：
    朱玲
补肾填精法对化疗源性卵巢早衰大鼠生育力保存的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2019
  • 期刊：
    广州中医药大学学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    郭淑敏;彭慧娟;周秀丽;朱玲
  • 通讯作者：
    朱玲

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    胡健;朱玲;毛伊敏
  • 通讯作者：
    毛伊敏
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  • 发表时间：
    --
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  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    吴婴南;倪杰;卢春;秦娣;朱玲
  • 通讯作者：
    朱玲

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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