通过异柠檬酸脱氢酶(IDH)的氨基酸序列比对及分析，利用蛋白质工程技术，将枯草杆菌NADP-依赖性的IDH(BsIDH)以及链球菌NAD-依赖性的IDH (SmIDH)中与辅酶特异性相关的保守氨基酸进行定点突变，使BsIDH和SmIDH的辅酶特异性分别转换成以NAD和以NADP为辅酶，以实验性数据验证E.coli的IDH功能进化的分子机制是具有普遍性的，不仅适用于革兰氏阴性细菌，也适用于革兰氏阳性细菌，为以后适用于真核生物IDH的研究奠定基础。另外通过细菌染色体同源重组，构建包含BsIDH和SmIDH编码基因的E.coli菌株，根据这些重组菌株在乙酸中生长的适应性变化，在细胞水平上进一步认识IDHs磷酸化调控作用的精细性，通过对IDHs磷酸化作用与IDHs功能进化的关系研究，为进一步探索和诠释乙醛酸旁路的起源与进化提供分子依据。