萘降解质粒pND6-1中水杨醛脱氢酶同工酶基因的生物学功能及生态意义

pND6-1是我们第一个测定全序列和注释基因的萘降解质粒，与其它萘降解质粒不同，在该质粒的萘降解操纵子之外存在另外三个与萘降解相关的基因：水杨醛脱氢酶基因nahF的同工基因nahV；水杨酸羟化酶基因nahG的同工基因nahU；儿茶酚1,2-双加氧酶基因catA。我们已经完成对nahU和catA基因的初步研究，本申请项目的主要内容是对nahV基因的生物学功能和生态意义进行研究。包括：表达nahV和nahF基因编码的酶，比较两个酶的酶学性质；分别敲除nahV基因和nahF基因，证明nahV基因的生物学功能；用实时荧光反转录PCR方法分析不同底物诱导的NahV蛋白的表达量，探讨NahV的表达调控机制；调查环境细菌中类nahV基因存在的普遍性，分析同工酶在细菌适应不利生态环境中的作用。本研究有助于完善萘降解细菌和质粒的进化理论，阐明降解性细菌与环境的适应关系，还可以为构建高效降解菌株提供新基因。