三分子荧光互补系统构建及活细胞内流感病毒mRNA-蛋白相互作用可视化研究
结题报告
批准号:
31070774
项目类别:
面上项目
资助金额:
32.0 万元
负责人:
崔宗强
学科分类:
C2105.交叉融合生物技术
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
刘家欣、高丁、尹娟、韩昱
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
客服二维码
微信扫码咨询
中文摘要
活细胞内mRNA-蛋白质相互作用可视化监测可以原位实时地解析这一生物学基本过程,是极具前景的新技术。mRNA介导荧光蛋白双片段互补即三分子荧光互补的概念是实现活细胞内mRNA-蛋白质相互作用可视化的新思路。基于我们前期建立的性能优越的mCherry双分子荧光互补系统,结合HIV REV-RRE、TAT-TAR等肽段-RNA序列的组合,本研究拟构建一种基于mCherry的新型三分子荧光互补系统,发展活细胞内mRNA-蛋白质相互作用可视化新方法,并把该方法应用于甲型H1N1流感病毒mRNA-蛋白质相互作用的活细胞内可视化研究,筛选与甲型流感病毒三种不同类型mRNA有相互作用的病毒蛋白和细胞蛋白,可视化分析流感病毒mRNA的出核过程,解释流感病毒mRNA选择性出核控制机理。本研究的开展,将发展活细胞内mRNA-蛋白质相互作用影像新技术,并深入解析流感病毒mRNA核质转运机制,具有重要的学术意义。
英文摘要
本研究基于mCherry双片段荧光互补系统,结合HIV REV-RRE、TAT-TAR等肽段-RNA序列相互作用组合,首次构建了一种红色mCherry三分子荧光互补系统,发展了可用于活细胞内mRNA-蛋白质相互作用可视化新方法。该方法用于在活细胞内可视化观察流感病毒NS1蛋白与NS 5’UTR, M 5’UTR,NP 5’UTR等mRNA序列之间的相互作用,证明mCherry三分子荧光互补系统是可视化研究mRNA-蛋白质相互作用的有力工具。进而,mCherry三分子荧光互补系统用于甲型H1N1流感病毒mRNA与宿主细胞内mRNA出核TAP途径相关蛋白相互作用可视化研究,发现UAP56、Aly、hnRNPA1等宿主蛋白与流感病毒三种不同类型的mRNA,包括不含内含子不需要剪接的NP mRNA,含内含子需要剪接的M2 mRNA,含内含子不需要剪接的NS1 mRNA之间均有相互作用,而细胞蛋白9G8只与含内含子需要剪接的M2 mRNA有相互作用,揭示了流感病毒mRNA选择性出核的重要机理。同时,将单体红色荧光蛋白mNeptune开发为一种远红光的双分子荧光互补系统。并进一步构建了基于mNeptune的远红光三分子荧光互补系统,检测了活细胞及活体内蛋白质-RNA的相互作用。利用mNeptune-TriFC系统,首次发现了PTB与HIV-1 3’LTR之间的相互作用,在HIV-1 mRNA的出核机制研究方面取得重要进展。部分相关结果已在SCI源刊Biosens Bioelectron和PLoS ONE发表论文3篇,国际重要会议邀请或口头报告3次。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Imaging of mRNA-protein interactions in live cells using novel mCherry trimolecular fluorescence complementation
使用新型 mCherry 三分子荧光互补对活细胞中 mRNA-蛋白质相互作用进行成像
DOI:--
发表时间:2013
期刊:PLos One
影响因子:3.7
作者:Cui Zongqiang;Zhu Duanhao;Zhang Zhiping;Wang Wei;Fan Jinyu;Men Dong;DengJiaoyu;Wei Hongping;Zhang Xian-En
通讯作者:Zhang Xian-En
Functionally Orthologous Viral and Cellular MicroRNAs Studied by a Novel Dual-Fluorescent Reporter System
通过新型双荧光报告系统研究功能直系同源病毒和细胞 microRNA
DOI:10.1371/journal.pone.0036157
发表时间:2012-04-27
期刊:PLOS ONE
影响因子:3.7
作者:You, Xiangyu;Zhang, Zhiping;Zhang, Xian-En
通讯作者:Zhang, Xian-En
DOI:--
发表时间:2011
期刊:Biosensors and Bioelectronics
影响因子:--
作者:Liang Yu;Zhang Zhiping;Wei Hongping;Hu Qinxue;Deng Jiaoyu;Guo Deyin;Cui Zongqiang;Zhang Xian-En;
通讯作者:
单病毒示踪
  • 批准号:
    31925025
  • 项目类别:
    国家杰出青年科学基金
  • 资助金额:
    400万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    崔宗强
  • 依托单位:
多功能病毒样颗粒用于恶性胶质瘤非侵入性脑内成像和靶向治疗
HIV-1病毒脱壳实时成像及机制研究
"量子点分子信标"用于活细胞内HIV mRNA动态示踪研究
国内基金
海外基金