新的黄体生成素受体剪切异构体(LHR-6A)的功能研究
结题报告
批准号:
81070666
项目类别:
面上项目
资助金额:
31.0 万元
负责人:
乔洁
依托单位:
学科分类:
H0702.松果体、下丘脑、垂体及相关疾病
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
韩兵、刘炳丽、沈灏、潘春明、刘威、姜鹤、吴佳君、郭郁郁、隋春华
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中文摘要
课题组在对Leydig细胞发育不良(LCH)家系的LHR剪切突变的功能研究中,发现了一种新的LHR剪切异构体(LHR-6A)。与以往的剪切异构体不同,LHR-6A为内含子6中的潜在剪切位点的激活,将159bp的内含子序列加入编码区中,形成含有209个氨基酸的截短蛋白质。这种蛋白质丧失了与配基125I-hCG的亲和力,但在正常人的卵巢和睾丸组织中表达很高。在3例LCH患者中发现"隐蔽外显子6A"的突变,致使其表达异常升高。从基因组的进化来看,这种新的剪切异构体为灵长类所特有。通过构建鼠-人嵌合的mLHR-6A质粒,转染小鼠睾丸间质细胞瘤细胞(mLTC-1)证实,LHR-6A的表达,可以调节hCG刺激后细胞内源性LHR的表达,提示这种新的剪切异构体可能参与下丘脑-垂体-性腺轴中激素的精细调控。进一步研究围绕LHR-6A是否参与对野生型受体的调控及其机制;并建立Knock-in动物模型探究其功能
英文摘要
在对我国第一例Leydig细胞发育不良(LCH)家系进行的分子遗传学研究中,发现了黄体生成素受体基因(LHR)2种新的突变类型,除了5号外显子的错义突变I152T 外,还发现LHR基因6号内含子剪切位点的突变(IVS6-3 C>A),造成外显子7缺失。在对LHR剪切突变的功能研究中,意外发现了新的LHR剪切异构体(LHR-6A),为灵长类动物所特有。由于LHR 6号内含子中存在2个潜在剪切位点,可分别将159bp和207bp的内含子序列加入编码区中,形成长型及短型的剪切异构体; 但其中存在的终止密码,使其翻译产物均为含209个氨基酸的截短蛋白质。体外转染试验发现,此截断的蛋白质由于缺乏跨膜域和部分胞外域,不能定位于细胞膜上,也不能与125I-hCG结合。进一步生物信息学分析发现,在这段序列中存在3个高频的SNP,其中rs68073206位于内含子6A的剪切供位的+5’位,在正常人中,GG、TG 和 TT 基因型的频率分别为9.9 %, 49.4%,和40.7%。对32例不孕不育女性颗粒细胞的研究发现,GG基因型中,长型转录产物显著升高,与体外诱变和细胞转染的结果一致。不孕不育女性GG基因型的频率略高于正常人群,提示此SNP可能与不孕不育相关。对LHR病理性剪切异构体的功能研究发现,外显子7缺失的受体可以定位于细胞膜上;但共转试验发现,此剪切异构体对野生型受体无显性负效应,相关结果作为封面论文,发表在Molecular Human Reproduction上,还有论文在撰写中。此外,在基金的资助下,对7例17α-羟化酶突变患者中3种新的突变类型了详尽的临床和分子功能研究,共发表SCI论文3篇;对2例多发性内分泌腺瘤综合征家系进行了分子遗传学以及组织学研究,发表SCI论文1篇;对1例年轻的21羟化酶缺陷症伴发多器官功能衰竭患者进行了成功抢救,相关经验总结后发表SCI论文1篇;对11例5α-还原酶突变的患者的研究中,阐述了中国人5α-还原酶突变的临床和基因突变特点,已被Clinical Endocrinology修回。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
A novel intronic mutation and a missense mutation of MEN1 identified in two Chinese families with multiple endocrine neoplasia type 1(MEN1)
在两个中国多发性内分泌肿瘤 1 型 (MEN1) 家系中发现 MEN1 的新内含子突变和错义突变
DOI:--
发表时间:2012
期刊:J Endocrinol Invest
影响因子:--
作者:Qiao J (乔洁);Song ZY;Wu JJ;Liu W;Liu BL;Ye XP;Chen X;Pan CM;Xu HY
通讯作者:Xu HY
A unique exonic splicing mutation in the CYP17A1 gene as the cause for steroid 17 alpha-hydroxylase deficiency
CYP17A1 基因中独特的外显子剪接突变是类固醇 17 α-羟化酶缺乏的原因
DOI:--
发表时间:2011
期刊:European Journal of Endocrinology
影响因子:5.8
作者:Song, Huai-Dong;Han, Bing;Liu, Bing-Li;Liu, Wei;Wu, Jia-Jun;Pan, Chun-Ming;Jiang, He;Gu, Ting;Jiang, Bo-Ren
通讯作者:Jiang, Bo-Ren
DOI:--
发表时间:2013
期刊:浙江医学
影响因子:--
作者:徐海燕;乔洁;韩兵;陈凯;夏苏娇;刘炳丽;郭郁郁;陆颖理;吴万龄
通讯作者:吴万龄
DOI:--
发表时间:2011
期刊:中华内分泌代谢杂志
影响因子:--
作者:陈名道;乔洁;刘炳丽;刘威;吴佳君;潘春明;姜鹤;顾婷;姜博仁
通讯作者:姜博仁
DOI:--
发表时间:2011
期刊:中华内分泌代谢杂志
影响因子:--
作者:吴万龄;乔洁;韩兵;朱惠;刘炳丽;顾岩;王兵;赵双霞;杨建军
通讯作者:杨建军
SMC5-NSMCE2功能异常激活APSCs中p53/p16衰老通路导致脂肪萎缩和胰岛素抵抗的机制研究
  • 批准号:
    82371873
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    50.00万元
  • 批准年份:
    2023
  • 负责人:
    乔洁
  • 依托单位:
不同位点NR5A1突变导致46,XY性发育异常表型异质性的机制研究
  • 批准号:
    81873652
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    60.0万元
  • 批准年份:
    2018
  • 负责人:
    乔洁
  • 依托单位:
P450c17双重催化活性的差异调控在多囊卵巢综合征高雄激素血症发生中的分子机制研究
  • 批准号:
    81570753
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    58.0万元
  • 批准年份:
    2015
  • 负责人:
    乔洁
  • 依托单位:
新的核因子AD-004在性腺中的功能研究
  • 批准号:
    30600297
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    22.0万元
  • 批准年份:
    2006
  • 负责人:
    乔洁
  • 依托单位:
国内基金
海外基金