不同治法方药对不同饲养环境下FM1流感小鼠TLR7/NF-κB、RLH信号转导调控机制的研究

批准号:
81473454
项目类别:
面上项目
资助金额:
72.0 万元
负责人:
江振友
依托单位:
学科分类:
H3301.中西医结合基础理论
结题年份:
2018
批准年份:
2014
项目状态:
已结题
项目参与者:
王辉、李恩庆、张玲敏、施珊珊、吴莎、于斌、黎贞燕、黄鸿兴、颜宇琦
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中文摘要
中药对流感防治有其独到之处,目前中药防治流感研究集中在对抗流感病毒药物的筛选,缺乏在中医理论指导下的分子机制研究。本研究采用TLR7-/-、MyD88-/-、RIG-I-/-小鼠和正常小鼠感染流感病毒株FM1,制造小鼠流感模型,并且人为制造寒、热、湿饲养环境,使用中医治疗外感表证的三种基本治法:辛温解表、辛凉解表、祛湿解表给予治疗。使用分子生物学、流式细胞仪及激光共聚焦显微镜等检测在不同饲养环境下,上述三种解表法对流感小鼠的病毒损伤恢复重要免疫通路TLR7/NF-κB及TLR7信号通路中信号蛋白的影响;细胞质的类维甲酸诱导基因-I样解旋酶(RLHs)及RLH信号通路中信号蛋白的影响。多途径、多靶点探讨不同解表法对流感小鼠的病毒损伤恢复重要免疫通路的细胞信号调控作用。其目的是探讨环境-机体-病原体三者相互作用对流感病情本身及治疗的影响机制,初步阐明几种常用解表法治疗该病的"同病异治"科学原理。
英文摘要
Traditional Chinese medicine (TCM) shows its originality in prevention and treatment of influenza. Currently, the study of TCM is focusing on screening of antiviral drugs, however, the molecular mechanisms under the Chinese medicine theory guidance is still not clear. To well understand the mechanism of influenza and its therapy which is associated with the interaction between environment, host and influenza virus, and briefly explain the principle of "treating same disease with different methods" by common resolving superficies method, we will conduct TLR?/?, MyD88?/? and RIG-I?/? mice and normal mice infected by FM1 virus. Furthermore, different feeding environment of cold, hot and moist will be provided artificially, and the mice will be treated by three basic treatments according to TCM guidance for superficies syndrome of exogenous disease formula for relieving superficies syndrome with pungent and warm natured drugs, pungent and cool natured drugs and desiccating formula respectively. We will use the knowledge of molecular biotechnology, flow cytometry (FCM) and confocal microscopy to analyze the injury and restoration of TLR7/NF-κB signal pathway, signal proteins involved in TLR7 pathway, RLH signal pathway and its signal proteins effect. From such multi-way and multi-target profiling, we analyze the regulation of cell signaling in immune signal pathways promoting recovery from FM1 virus infected model treated by different resolving superficies method.
中药对流感防治有其独到之处,目前中药防治流感研究集中在对抗流感病毒药物的筛选,缺乏在中医理论指导下的分子机制研究。本课题研究不同中药治疗原则对甲型流感病毒FM1株感染三种不同环境小鼠肺部TLR7和RLH信号通路的影响,探讨其抗病毒的作用机制。本研究采用敲基因鼠(TLR7−/−小鼠)、敲基因鼠(MAVS−/−小鼠)和正常野生型C57BL/6小鼠随机为6组,正常对照组、病毒对照组、奥司他韦组、银翘散组、桂枝麻黄各半汤组、新加香薷饮组,饲养于正常环境、寒环境和湿热环境。三种不同环境小鼠造模11天,第11天通过滴鼻建立小鼠流感模型,24小时后分别用奥司他韦、银翘散、桂枝麻黄各半汤、新加香薷饮治疗流感小鼠,每天一次,共5天,第17天处死小鼠取材。每天观察并记录小鼠的状态和体重等。通过流式细胞术检测小鼠脾免疫细胞Th1/Th2、Th17/Treg的比例。肺组织病理观察小鼠肺部炎症状况。RT-qPCR和Western-blot检测小鼠肺部免疫细胞TLR7信号通路中TLR7, MyD88, NF-κBp65和RLH信号通路中RIG-I、MAVS、NF-κBp65的表达水平。银翘散和桂枝麻黄各半汤可减轻正常环境C57BL/6小鼠肺部炎症,桂枝麻黄各半汤可减轻寒环境C57BL/6小鼠肺部炎症,新加香薷饮可减轻湿热环境C57BL/6小鼠肺部炎症。流式细胞术结果显示奥司他韦和三组中药可不同程度下调Th1/Th2和Th17/Treg比值。RT-qPCR和Western-blot检测结果显示在正常环境中,桂枝麻黄各半汤和银翘散可下调流感C57BL/6小鼠肺中TLR7通路中TLR7,MyD88和NF-κBp65和RLH信号通路中RIG-I、MAVS、NF-κBp65的表达;在寒环境中,桂枝麻黄各半汤可下调流感C57BL/6小鼠肺中TLR7通路中TLR7,MyD88和NF-κBp65和RLH信号通路中RIG-I、MAVS、NF-κBp65的表达;在湿热环境中,新加香薷饮可下调流感C57BL/6小鼠肺中TLR7通路中TLR7,MyD88和NF-κBp65和RLH信号通路中RIG-I、MAVS、NF-κBp65的表达。本实验依据环境-机体-病原体三者相互作用对病情本身的影响,初步阐明中医使用不同解表法治疗流感的机理,为“同病异治”治疗流感的原理提供依据。
期刊论文列表
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专利列表
DOI:--
发表时间:2017-05
期刊:Journal of Pharmaceutical and Biomedical Sciences,
影响因子:--
作者:Jiu-Yang Yu;Yu-Qi Yan;Jiang Zhenyou
通讯作者:Jiang Zhenyou
A Disposable Electrochemical Immunosensor Based on PDDA-functionalized Graphene/Gold Nanoparticles Composites for Detection of Inflammatory Cytokine Interleukin-22
基于 PDDA 功能化石墨烯/金纳米粒子复合材料的一次性电化学免疫传感器,用于检测炎症细胞因子 Interleukin-22
DOI:10.1016/s1452-3981(23)06734-2
发表时间:2015-08
期刊:International Journal of Electrochemical Science
影响因子:1.5
作者:Yan Yuqi;Shi Shanshan;Yu Jiuyang;Zhang Mengyuan;Zhang Yaru;Huang Hongxin;Li Jiong;Jiang Zhenyou
通讯作者:Jiang Zhenyou
DOI:--
发表时间:2018
期刊:中药新药与临床药理
影响因子:--
作者:秦洪琼;符莹洁;颜宇琦;江振友
通讯作者:江振友
Effects of Gui Zhi Ma Huang Ge Ban Tang on the TLR7 Pathway in Influenza Virus Infected Mouse Lungs in a Cold Environment.
桂枝麻黄葛半汤对寒冷环境下流感病毒感染小鼠肺TLR7通路的影响
DOI:10.1155/2018/5939720
发表时间:2018
期刊:Evidence-based complementary and alternative medicine : eCAM
影响因子:--
作者:Qin HQ;Shi SS;Fu YJ;Yan YQ;Wu S;Tang XL;Chen XY;Hou GH;Jiang ZY
通讯作者:Jiang ZY
Anti-influenza activity of berberine improves prognosis by reducing viral replication in mice
小檗碱的抗流感活性通过减少小鼠病毒复制来改善预后
DOI:10.1002/ptr.6196
发表时间:2018-12-01
期刊:PHYTOTHERAPY RESEARCH
影响因子:7.2
作者:Yan, Yu-Qi;Fu, Ying-Jie;Jiang, Zhen-You
通讯作者:Jiang, Zhen-You
寨卡病毒影响hNCCs-MSCs成骨能力及其表观遗传学机制
- 批准号:--
- 项目类别:省市级项目
- 资助金额:10.0万元
- 批准年份:2019
- 负责人:江振友
- 依托单位:
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