猪肺炎支原体LAMPs在宿主免疫细胞凋亡中作用机制研究

猪肺炎支原体是猪地方性肺炎的重要致病因素，引起养猪业的重大经济损失。支原体的膜脂相关蛋白在支原体病中起着非常重要的作用。在本课题中，我们探讨了猪肺炎支原体膜脂蛋白对宿主外周血淋巴细胞核免疫细胞系猪肺泡巨噬细胞系的致病机制，包括调控炎症、凋亡和相关细胞通路的激活等。.膜脂蛋白抑制猪外周血淋巴细胞的生长。猪肺炎支原体膜脂蛋白诱导细胞因子，如IL-6和IL-1β的上调，并且诱导一氧化氮和超氧化物的产生。通过Annexin-V-FITC和PI双染和流式细胞仪分析表明，猪肺炎支原体膜脂蛋白诱导猪外周血淋巴细胞中的淋巴细胞和单核细胞时间依赖性的的凋亡，并且该凋亡被一氧化氮合成酶的抑制剂或抗氧化物抑制。而且，膜脂蛋白诱导猪外周血淋巴细胞的p38 的磷酸化，促凋亡蛋白Bax与抗凋亡蛋白Bcl-2的比率的增高，激活Caspase-3和8，多聚ADP核糖聚合酶的裂解。这些结果表明猪肺炎支原体在体外能诱导猪外周血淋巴细胞的炎症因子、一氧化氮、活性氧和凋亡的产生。凋亡的产生式通过p38 MAPK通路、Bax/Bcl-2信号通路和Caspase通路。.在本课题中，我们也探讨了猪肺炎支原体膜脂蛋白对猪肺炎支原体膜脂蛋白对猪肺泡巨噬细胞系3D4/21细胞系的作用。猪肺炎支原体膜脂蛋白能诱导猪肺泡巨噬细胞系3D4/21细胞产生凋亡小体，增加TUNEL阳性细胞的阳性率。并且，通过Annexin-V-FITC和PI双染色和流式细胞术分析表明猪肺炎支原体膜脂蛋白诱导猪肺泡巨噬细胞系的时间依赖的凋亡。而且，膜脂蛋白诱导诱导超氧化物和caspase-3的升高。而且凋亡速率的增加和caspase-3的激活收到一氧化氮合成酶和抗氧化物的抑制。这表明猪肺炎支原体膜脂蛋白诱导猪肺泡巨噬细胞的凋亡通过NO产生、超氧化物生产和caspase-3激活。.本课题进一步阐明了猪肺炎支原体诱导机体产生免疫抑制的机制，进一步研究了猪肺炎支原体的致病机理，为气喘病的防治提供重要的基础。