关于脑络通药物调控动脉粥样硬化相关炎症信号通路机理的分子免疫学研究

批准号:
81302902
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
23.0 万元
负责人:
严士海
依托单位:
学科分类:
H3105.中医方剂学
结题年份:
2016
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
赵宁伟、李七一、刘福明、符蕊、王琼、王海丹、郁斌、陈艺、周杰
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中文摘要
Ross"损伤反应"学说认为血管内皮炎性损伤是动脉粥样硬化(AS)形成的重要因素。前期实验显示:①在oxLDL的刺激下,蛋白激酶C与NADPH氧化酶相互作用介导的氧化应激炎症反应会促进AS的恶化;②脑络通(国医大师周仲瑛教授创立,主要成分:首乌、黄精、海藻、水蛭、三七、川芎)能够降低血管组织中CD40/CD40L mRNA的表达,但其分子机理尚未充分阐明。本研究拟采用ApoE-/-小鼠、血管内皮细胞损伤模型和HEK293模式细胞,应用RT-PCR、Western blot、免疫沉淀、体外过表达、siRNA等手段,观察脑络通如何干预蛋白激酶C与NADPH氧化酶膜蛋白复合体的激活及其传递的细胞信号,包括:①核因子-κB和p38蛋白激酶的激活,及其下游炎症因子如CD40/CD40L、MMPs的高表达;②核因子Oct-1及其调控的细胞色素P450的高表达,P450负责催化血管平衡因子EDHF的合成
英文摘要
The latest investigations have shown that endothelial cell inflammatory lesions are the foundation of atherosclerosis (AS). Upon the stimulation of oxLDL, the interaction between PKC and NADPH oxidase mediated inflammation mutually promote vessel wall matrix reconstruction, leading to the further deterioration of disease. Zishenyanggan Huatanxiaoyu therapy proposed by professor Zhou ZhongYing has been used as the classic therapy for AS. The previous reports have shown that Zishenyanggan Huatanxiaoyu prescript (Radix Polygoni multiflori Preparata, Sealwort, Sargassum, Leech,Pseudo-ginseng,Ligusticum wallichii) can significantly improve the symptoms of AS patients, such as dizziness, brain-ming, forgetfulness, weak waist, dark red or purple tongue, reduce the whole blood viscosity, serum CRP and CD40/CD40L mRNA expressions, restrain inflammation, and narrow plaques area in patients. However, the mechanism of action remains to be further expounded. This study is desigined to determine that Zishenyanggan Huatanxiaoyu therapy has the ability to inhibit the interaction between PKC and NADPH oxidase mediated inflammation, control fiber sticky protein expression, and protect the apoE-/-mice from endothelial injury. In this program, a vatiety of assays were performed, including semiquantitative RT-PCR、Western blot、Immunoprecipitation、gene overexpression and siRNA transfection, etc. Thus, the study is expected to provide scientific proofs for the traditional Chinese medicine therapy of AS.
动脉粥样硬化(AS)是一种慢性的以动脉结构和功能改变为特征的疾病,是心脑血管病的主要病理基础。滋肾养肝化痰消瘀法是国医大师周仲瑛教授提出的防治AS的经典治法,脑络通依据该法创立。Ross“损伤反应”学说认为血管内皮细胞炎性损伤是AS形成的关键环节。本项目在国家自然科学基金(81302902)的资助下,依据合同,通过载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠AS模型与细胞损伤模型,研究脑络通对AS血管炎症反应因子的影响。取得了如下成果:(1)脑络通可以降低ApoE-/-小鼠AS模型血液中TC、TG、LDL-C的水平,调节血脂;升高SOD、GSH的浓度,降低MDA的浓度、降低ox-LDL的浓度,显示其抗氧化作用;降低血管组织ICAM-1与TNFα等炎症因子的表达,降低LOX-1与LOX-1 mRNA的水平;抑制斑块面积。(2)脑络通具有改善血管重构的作用,其机制可能与降低MMP2、MMP9、MT1-MMP水平,增加TIMP1、TIMP2的表达有关。(3)脑络通抑制板块生长,调控ApoE-/- 小鼠AS相关NADPH氧化酶和PKC介导的炎症信号通路,降低血管粥样板块Rac-1、p47phox、phospho-p38、phospho-PKCα/β、phospho-AMPKα、phospho-Akt、phospho-eNOS、phospho-IκBα的表达。(4)体外细胞实验显示脑络通可以调节血管稳态,降低CYP450s (CYP1A1、CYP2B6、CYP2C8、CYP2D6)蛋白的表达,而且是与核因子Oct-1相关。(5)脑络通可以抑制LOX-1的表达,免疫共沉淀结果显示脑络通抑制了其相关蛋白phospho-PKCα/β、Rac-1、p47phox、p22phox、phospho-p47phox的表达。(6)开展了临床研究。结果显示脑络通可以改善AS患者的临床症状,通过改善患者颈动脉内膜-中层厚度、阻力指数、血脂水平、血流变水平、炎症因子水平等,来延缓动脉粥样硬化的发生发展,具有良好的药物安全性。(7)项目数据翔实,思路先进,发表论文6篇,培养研究生与青年科研人才5名,申请专利1项。项目总体完成了任务,阐述了中药复方脑络通治疗AS的机理,揭示了周仲瑛教授治疗AS的滋肾养肝化痰消瘀法的现代科学内涵,传承了周老的中医药思想。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2014
期刊:四川中医
影响因子:--
作者:刘福明;赵宁伟;卢征涛;刘园园
通讯作者:刘园园
Hsp90b is involved in the development of high salt-diet-induced nephropathy via interaction with various signalling proteins
Hsp90b 通过与各种信号蛋白相互作用参与高盐饮食诱发的肾病的发生
DOI:--
发表时间:--
期刊:Open Biology
影响因子:5.8
作者:Yan-hong Gao;Feng Gao;Fu-ming Liu;Zhu-yuan Fang
通讯作者:Zhu-yuan Fang
DOI:--
发表时间:2016
期刊:中成药
影响因子:--
作者:张建平;王海丹;高峰;朱长乐.
通讯作者:朱长乐.
DOI:--
发表时间:--
期刊:江苏中医药
影响因子:--
作者:顾万建;刘牛;严士海;刘福明
通讯作者:刘福明
DOI:--
发表时间:--
期刊:江苏中医药
影响因子:--
作者:王露;刘福明
通讯作者:刘福明
基于Keap1/Nrf2介导的线粒体自噬—细胞焦亡信号网络探讨参葵通脉颗粒改善慢性心衰的分子机制
- 批准号:82074320
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:55万元
- 批准年份:2020
- 负责人:严士海
- 依托单位:
国内基金
海外基金
