H9N2亚型禽流感病毒NS1蛋白致鸡输卵管上皮细胞病变作用的分子机制

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基本信息

  • 批准号：
    31272577
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    80.0万
  • 负责人：
    王晶钰
  • 依托单位：
    西北农林科技大学
  • 学科分类：
    C1802.兽医病毒学
  • 结题年份：
    2016
  • 批准年份：
    2012
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2013-01-01 至2016-12-31

项目摘要

H9N2 avian influenza virus (AIV) infection in the layers can cause serious decline in egg production, produce deformity eggs, sand preserved eggs and soft-shell egg,and this situation can last 1-2 months, causing serious economic loss. However, the pathogenic mechanism of H9N2 AIV infection is not clear. We found that H9N2 AIV infection could cause cells lesions and apoptosis in chicken oviduct epithelium cells(OECs). The determination of this experiment is to research the sub-cellular localization of NS1 protein of H9N2 AIV in Chicken OECs and the main functional region that NS1 causes cell lesions and apoptosis by transfecting NS1 gene into chicken OECs, to explore intracellular protein that directly interact with AIV NS1 in chicken OECs, to verify proteins that take key role in AIV infection in chicken OECs and to reveal the approach that NS1 protein causes cell apoptosis of Chicken OECs.Through this study，we expect that we can explore the molecular mechanism of pathological lesions in chicken OECs induced by H9N2 AIV and reveal the mechanism of egg abnormally in layers caused by H9N2 AIV. The results can also provide new ideas for prevention and control of H5NI avian influenza which has important scientific significance and potential application prospect.
H9N2亚型禽流感病毒（AIV）感染产蛋鸡群可引起产蛋率严重下降，产出畸形蛋、砂皮蛋和软壳蛋，持续时间长达1～2个月，引发严重的经济损失。但H9N2 AIV感染引起产蛋鸡产蛋异常的机理并不十分清楚。我们发现H9N2亚型AIV感染鸡输卵管上皮细胞（OECs）可引起细胞病变及凋亡。本研究拟将H9N2 AIV的NS1基因转染鸡OECs，研究H9N2 AIV的NS1蛋白在鸡输卵管上皮细胞中的亚细胞定位和NS1引起细胞病变和凋亡作用的主要功能区，探明鸡输卵管上皮细胞中与AIV NS1直接相互作用的胞内蛋白，明确鸡OECs内与禽流感病毒感染起关键作用的蛋白质分子。揭示NS1蛋白致鸡输卵管上皮细胞凋亡的途径。探索H9N2 AIV诱导鸡输卵管上皮细胞病变的分子机制，揭示H9N2禽流感病毒引起产蛋鸡产蛋异常的机理。研究获得的成果还可以为H5N1禽流感防控提供新的思路，具有重要的科学意义和潜在的应用前景。

结项摘要

H9N2亚型禽流感病毒（AIV）感染产蛋鸡群可引起产蛋率严重下降，产出畸形蛋、砂皮蛋和软壳蛋。但H9N2 AIV感染引起产蛋鸡产蛋异常的机理并不十分清楚。本项目研究了鸡输卵管组织中流感病毒SA受体分布特征，证实鸡输卵管组织中存在丰富的SAα-2,3Gal受体和少量的SAα-2,6Gal受体，受体丰度与输卵管粘膜上纤毛柱状上皮细胞的多少呈正相关。建立了永生化的鸡输卵管上皮细胞株。确定了H9N2 AIV NS1蛋白在鸡输卵管上皮细胞的亚细胞定位于细胞核染色质上。AIV NS1蛋白能够引起鸡输卵管上皮细胞发生氧化应激并诱导细胞凋亡。揭示了AIV NS1蛋白5个重要的功能位点对诱导宿主细胞凋亡有重要影响。揭示了H9N2 AIV及其NS1蛋白诱导主要先天性免疫相关基因（模式识别受体、细胞因子、趋化因子 等）mRNA表达变化规律。研究发现蛋鸡感染H9N2 AIV后输卵管组织中病毒载量与其组织病理学变化存在明显的正相关；证实H9N2 AIV对膨大部的感染会影响其分泌功能，对子宫部的损伤会导致蛋壳不能正常形成，这可能是流感病毒感染母鸡产软壳蛋和沙皮蛋的原因之一。研究发现蛋鸡感染H9N2 AIV后鸡蛋品质下降与CaBP-D28k、OVA基因的显著下调有关。本项目研究结果为深入了解H9N2 AIV及其NS1蛋白致病的分子机制提供了新的科学资料。

项目成果

期刊论文数量（6）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
H9N2亚型禽流感病毒对鸡输卵管致病性的研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    中国兽医学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    陈婷;王利勤;董睿;张渭东
  • 通讯作者：
    张渭东
蛋鸡感染 H9N2 AIV 后输卵管不同部位病毒的分布及病理组织学观察
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    动物医学进展
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李涛;王秋珍;伍成奇;王晶钰
  • 通讯作者：
    王晶钰
The NS1 protein of avian influenza virus H9N2 induces oxidative-stress-mediated chicken oviduct epithelial cells apoptosis
禽流感病毒H9N2 NS1蛋白诱导氧化应激介导鸡输卵管上皮细胞凋亡
  • DOI：
    10.1099/jgv.0.000625
  • 发表时间：
    2016-12-01
  • 期刊：
    JOURNAL OF GENERAL VIROLOGY
  • 影响因子：
    3.8
  • 作者：
    Qi, Xuefeng;Zhang, Huizhu;Wang, Jingyu
  • 通讯作者：
    Wang, Jingyu
Apoptosis induction and release of inflammatory cytokines in the oviduct of egg-laying hens experimentally infected with H9N2 avian influenza virus
实验感染H9N2禽流感病毒的蛋鸡输卵管细胞凋亡诱导及炎性细胞因子释放
  • DOI：
    10.1016/j.vetmic.2015.04.005
  • 发表时间：
    2015-06-12
  • 期刊：
    VETERINARY MICROBIOLOGY
  • 影响因子：
    3.3
  • 作者：
    Wang, Jingyu;Tang, Chao;Xu, Xingang
  • 通讯作者：
    Xu, Xingang
Modulation of the innate immune-related genes expression in H9N2 avian influenza virus-infected chicken macrophage-like cells (HD11) in response to Escherichia coli LPS stimulation
H9N2 禽流感病毒感染的鸡巨噬细胞样细胞 (HD11) 响应大肠杆菌 LPS 刺激的先天免疫相关基因表达的调节
  • DOI：
    10.1016/j.rvsc.2016.11.008
  • 发表时间：
    2017-04-01
  • 期刊：
    RESEARCH IN VETERINARY SCIENCE
  • 影响因子：
    2.4
  • 作者：
    Qi, Xuefeng;Liu, Caihong;Wang, Jingyu
  • 通讯作者：
    Wang, Jingyu

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    王秋旺
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    --
  • 发表时间：
    2016
  • 期刊：
    工程热物理学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    王晶钰;刘衍;杨剑;丁旭刚;王秋旺
  • 通讯作者：
    王秋旺

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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