系统性沉默组成型高表达HSPs探究日本血吸虫抗胁迫维自稳的应激机制

HSPs超家族对生命体的抗应激胁迫作用一直是生命科学最为瞩目的研究热点，从维护生命体的自稳作用而言，HSPs超家族形成一个自成体系的调控网络，并在感染性疾病和肿瘤的防治研究中占有重要地位。对于血吸虫而言，HSPs同样在其生活史中占据重要的地位，在血吸虫抗胁迫维自稳得以繁衍生息的过程中的作用至关重要。本课题以日本血吸虫组成型高表达sHSP-Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90为核心靶标，以MEGAscript RNAi kit 合成dsRNA, 化学合成FAM荧光标记的siRNA, 成功建立了dsRNA浸泡法、dsRNA电转化法和siRNA电转化法，以进行sHSP-Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90在血吸虫生活史不同阶段的RNAi，结果：三种方法均能达到良好的干涉效应，Real time PCR 和Western blot 呈示在转录和蛋白质表达水平均呈明显下降，四种HSPs靶标分子间存在不同的协同反应，对虫体的生存状态和雌虫产卵等产生显著影响。四种HSPs靶标分子中高效特异的siRNA干涉小片段正在进一步的筛选中。本研究为下一步构建鸡尾酒式的HSPs-siRNA治疗体系和HSPs复合肽疫苗，以达成系统性摧毁日本血吸虫应激反应体系的远期目标，奠定了良好的科学基础。