背景与目的： .目前全球至少有20亿人存在结核杆菌的潜伏感染（latent tuberculosis infection, LTBI）。潜伏结核感染已成为结核病防治中的一个巨大障碍。如何有效地根治LTBI已经成为当前结核病防治工作中必须面对的难题。.方向：结核病的治疗。.主要研究内容： .构建Mtb噬菌体LysinA、LysinB/Holin原核表达载体并制备活性蛋白及多克隆抗体；在含有分枝杆菌属OriM复制子的真核共表达质粒pZM0M基础上构建噬菌体LysinA-LysinB/Holin真核共表达质粒pZM0A并检测其在Mφ内的有效表达；将pZM0A电转化入耻垢分枝杆菌载体中，鉴定正确后，大量扩增该重组治疗性活疫苗；细胞水平检测该活疫苗对治疗性基因的靶向递送、表达、对巨噬细胞（macrophage, Mφ）内Mtb的杀伤效果及对细胞的可能毒副作用；建立活动性结核感染模型及潜伏结核感染模型，动物实验评价该治疗性活疫苗对结核感染的治疗作用；用高通量基因芯片/荧光定量PCR研究潜伏感染患者外周血CD4+T细胞内miRNAs、mRNAs和lncRNAs的差异表达与涉及的信号通路。.重要结果与关键数据：.成功构建了Mtb噬菌体LysinA、LysinB/Holin原核表达载体，制备了活性蛋白及获得了高质量的兔源多克隆抗体；在含有分枝杆菌属OriM复制子的真核共表达质粒基础上，成功构建了结核分枝杆菌噬菌体LysinA-LysinB/Holin真核共表达质粒pZM0A；pZM0A携载的分枝杆菌噬菌体LysinA-LysinB/Holin能成功在巨噬细胞内表达且具有明显的杀菌效果；细胞水平的结果表明，携载pZM0A的耻垢分枝杆菌重组治疗性活疫苗具有良好的巨噬细胞靶向性，对正常巨噬细胞无明显毒副作用，且具有良好的杀菌效能；动物实验结果表明，重组治疗性活疫苗对结核感染小鼠有非常显著地治疗杀菌效果，能明显刺激结核感染小鼠的脾淋巴细胞增殖，能显著增加细胞因子IFN-γ，TNF-α的含量，同时对小鼠本身无明显毒副作用；潜伏结核感染组外周血CD4+T有多个miRNA和lncRNA的表达发生了变化，预测靶基因集合显著富集于局部黏附信号通路、细胞外基质-受体相互作用、MAPK信号通路等方面。.科学意义：.本课题构建的新型结核治疗性活疫苗以耻垢分枝杆菌为生物载体，携带并靶向递送Mt