气道上皮整合素β4表达缺陷致免疫定式切换及其机制研究

在本课题前期研究中发现哮喘患者存在气道上皮的整合素β4 表达缺陷，且细胞水平观察到整合素β4沉默致气道上皮细胞抗原提呈Th1途径免疫激活功能抑制。猜想，整合素β4 表达缺陷可能导致气道上皮细胞的免疫激活定式由正常的Th1 优势切换到了Th2 优势，从而构成局部免疫失平衡的哮喘易感性基础。本项目研究完成情况如下：(1)构建integrinβ4正常表达和沉默的人支气管上皮细胞系，integrin β4表达下调后，气道上皮细胞的抗原识别摄取速度明显减慢，与T淋巴细胞共培养后，T淋巴细胞的增殖减少，Th1分化通路的细胞因子数量明显降低。(2) LPS分别刺激正常人支气管上皮细胞系及integrin β4沉默人支气管上皮细胞系，结果显示integrin β4沉默的人支气管上皮细胞TLR4表达增加趋势更加明显，MyD88和TRIF表达明显增多，IFN-β和TNF-α在integrin β4沉默后分泌量明显增加。(3)成功构建integrinβ4条件性基因敲除小鼠模型， integrin β4条件性敲除小鼠在HDM应激后气道局部炎症反应增强，呈现Th2型免疫优势炎症反应，证实integrinβ4 表达缺陷与免疫定式切换的直接相关性。