透明质酸定向诱导骨髓间充质干细胞治疗骨关节炎的实验研究

取得了以下成果 以拉丁方设计在Muehlema法基础上，通过改变剂量和时间间隔的不同组合，摸索出了OA不同病理分期的兔模型建模条件。其X线Kellgren&Lawrence OA分级标准与大体标本McDevitt-Muir分级和组织病理学Maier分期具有一致性。一致性检验Kappa值0.905（P＜0.01)，Pearson相关系数78.80（P＜0.01)。提示将X线作为无创的不同病理时期OA兔模型造模成功率和病情变化的监测手段。不同病理时期软骨和骨合成降解标记、细胞因子以及蛋白酶也存在差异。在病理学、影像学、生化指标等多方面能模拟了人OA的病理进展变化，在国内外尚无类似报道。每个病理时期造模成功兔24只，随机分为3治疗组：HA组、MSCs组、HA诱导MSCs组（HA+MSCs组）。治疗侧膝关节予以相应治疗，对照侧膝关节以等量生理盐水治疗，每周一次×3。治疗结束后3周后进行X线、SPECT和PET-CT核素扫描。取膝关节修复标本进行大体形态学、组织病理学、免疫组织化学和免疫荧光等检测。HA+MSCs组较HA组和MSCs组有更好的影像学和病理学改善，早期治疗较进展期和慢性期有更好疗效。微环境对MSCs分化有重要影响，尤其是血清TGFβ水平（OR值2.766）。慢性期MSCs关节腔内注射反而会加重影像学和病理学进展。实时定量荧光PCR对新生修复组织成分mRNA水平的检测显示，MSCs和HA+MSCs组II型胶原和软骨蛋白聚糖（软骨标记物）表达在各个病理时期均要高于HA组。骨桥蛋白（骨标记物）、Ⅹ型胶原和基质金属蛋白酶-13（软骨肥大化标记）在慢性期表达也显著高于HA组和早期。另一方面，HA定向诱导MSCs关节腔内治疗对微环境也有调节作用。早期应用HA定向诱导MSCs分化后关节腔内注射治疗OA有最好的软骨修复效果。