系列紫杉醇-靶向多肽偶合物的设计及化学合成研究

生长抑素受体（STTR）及其亚型是肿瘤细胞的特殊受体之一。奥曲肽具有更强的STTR亲和能力和稳定性。因此，本研究利用奥曲肽及其类似物对肿瘤细胞的靶向性，将高效化学抗癌药物紫杉醇（PTX）通过化学键连接，合成紫杉醇-靶向多肽复合物，研究肿瘤的靶向治疗，提高紫杉醇的生物利用度，降低其不良反应。本课题的研究内容如下：（1）利用酪氨酸侧链的酚羟基，将其连接在固相树脂上，使酪氨酸的C-端和N-端都能裸露，建立了基于N-端与C-端分别进行衍生的固相肽合成新方法，拓宽了固相肽合成的适用范围，可用于靶向多肽Tyr3-奥曲肽和维瑞肽的合成；（2）以丁二酰基作为连接臂，将紫杉醇与Lys5侧链氨基用烯丙甲酯基（Alloc）保护的三种靶向肽缩合，在中性条件下，用Pd(PPh3)4/dimedone组合脱去Alloc保护基，制备了第一组紫杉醇-靶向多肽复合物：PTX-1-奥曲肽、PTX-1-Tyr3-奥曲肽和PTX-1-维瑞肽；（3）利用N端Fmoc保护的靶向多肽Lys侧链的氨基与PTX-Su-OH缩合，用30%吗啉脱去Fmoc，HPLC纯化，制备了第二组PTX-5-靶向多肽偶合物：PTX-5-奥曲肽、PTX-5-Tyr3-奥曲肽和PTX-5-维瑞肽；（4）利用靶向多肽N端氨基和Lys侧链的氨基与PTX-Su-OH缩合，经 HPLC纯化，制备了第三组(PTX)2-靶向多肽偶合物：(PTX)2-奥曲肽、(PTX)2-Tyr3-奥曲肽和(PTX)2-维瑞肽；（5）基于前期研究结果，重点探评价了第三组紫杉醇-靶向多肽偶合物对宫颈癌Hela细胞、乳腺癌MCF-7细胞、肺癌A549细胞和淋巴瘤白血病K562细胞的生长抑制作用，发现三种紫杉醇-靶向多肽偶合物均对肿瘤细胞的生长具有强抑制作用，(PTX)2-维瑞肽的活性低于紫杉醇，而(PTX)2-奥曲肽和(PTX)2-Tyr3-奥曲肽对四种肿瘤细胞的抑制活性与紫杉醇相当；（6）体内抗肿瘤活性结果表明，腹腔注射给药后，(PTX)2-Tyr3-奥曲肽可显著抑制黑色素瘤的生长，活性与紫杉醇相当。药代动力学研究显示，PTX)2-Tyr3-奥曲肽的平均滞留时间MRT比紫杉醇大幅延长，而清除率CLz显著下降，AUC值也显著高于紫杉醇组。因此，(PTX)2-Tyr3-奥曲肽能够改善紫杉醇的药代动力学参数，可以解决紫杉醇半衰期短等问题，为今后的研究奠定了基础。