新的肝细胞胆管侧极性分子1F9的抗原鉴定及其参与胆汁排泄的功能研究

肝细胞胆管侧极性分子（HCPMs）是参与肝细胞胆汁排泄的关键分子，其功能障碍或表达缺失可导致严重的肝内胆汁淤积。已知的HCPMs不能完全解释胆汁排泄的生理过程和肝内胆汁淤积的发病机制，寻找新的HCPMs尤为重要。1F9是本所发现的特异性识别人HCPM的单抗，免疫组化及电镜显示其抗原在正常肝细胞中呈极性分布，定位于肝细胞胆管侧内体囊壁上,进一步发现1F9抗原对肝内胆汁淤积性疾病PBC具有重要的病理诊断价值，但1F9抗原的本质不清。本项目围绕1F9抗原的鉴定及其在PBC中的异常表达进行研究。首先，通过蛋白质组学技术，尤其是质谱分析技术，成功获得1F9候选抗原；其次，通过免疫沉淀结合Western blot分析、连续正常组织芯片、激光共聚焦、真核表达系统及免疫电镜检测等手段，层层深入、不断完善，最终得出LAMP-2分子为1F9抗原的结论；最后，通过免疫组化、Q-PCR、ELISA、免疫电镜等方法，从蛋白水平、mRNA水平、血清学、亚细胞定位等不同角度，较细致地探讨了LAMP-2在胆汁淤积性疾病PBC中的异常表达，为深入探讨LAMP-2参与PBC的机制奠定了坚实的理论基础。