天蓝色链霉菌中一种DNA硫化修饰依赖型限制系统的发现和功能研究

模式链霉菌天蓝色链霉菌M145不仅对不同类型的甲基化DNA具有很强的限制性，本研究发现它对新型的DNA磷硫酰化修饰限制也很强。通过比较基因组学的研究发现，一个16.9kb的基因岛上的基因sco4631被敲除之后，突变株不再限制磷硫酰化DNA。在大肠杆菌中表达该蛋白，纯化后的蛋白不仅可以切割磷硫酰化的DNA，同时还可以切割被Dcm修饰过的DNA，但是这种切割需要Mn2+存在。后一种活性通过体内试验也得到了验证。通过footprinting试验，我们鉴定了该蛋白识别甲基化和磷硫酰化DNA的优先位点，同时，通过末端克隆鉴定了这个异常限制酶切割这两种类型修饰DNA的精确位点,相关工作发表在2010年12月《PLoS Genetics》上。审稿人称这是一个开创新时代的 (epoch-making)发现。目前，Sco4631晶体已经拿到，但是，多次X-光衍射图的分辨率都在3埃以上，目前还没有办法对其结构进行解析，后续工作正在努力进行。