SPLUNC1是覆盖在呼吸上皮表面的固有免疫分泌蛋白，可能起到阻止致病微生物与上皮直接接触的作用。本研究收集正常人鼻咽分泌物，从中分离了SPLUNC1蛋白，发现SPLUNC1与上呼吸道感染密切相关，能明显抑制道绿脓杆菌、流感嗜血杆菌的菌落形成。我们进一步纯化这些细菌的脂多糖，建立了小鼠败血症模型，发现SPLUNC1能明显抑制败血症小鼠的体温升高，而小鼠肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素10的表达下降。接着我们根据SPLUNC1蛋白的活性中心、保守序列、等电点、亲疏水性及氨基酸组成等设计了三段SPLUNC1的多肽，分别命名为AMP（Anti-Mircobial Peptides）1, 2, 3。再利用不同浓度AMP1、2、3对多种菌株进行处理，发现AMP1对绿脓杆菌、流感嗜血杆菌，肺炎克雷伯杆菌、以及白色念珠球菌等都有抑制作用，以白色念珠球菌的作用更为明显。为进一步检测AMP对白色念珠菌的影响及其最小抑菌浓度（MIC），我们首先检测了白色念珠菌的对数增长期，再利用不同浓度的AMP分别对白色念珠菌进行处理14-62小时，确定了三种AMP的MIC。通过电子显微镜观察AMP处理后的细菌结构变化，发现处理24小时后可见细菌细胞壁有缺损,48小时后细胞器及细胞核消失,整个细胞坏死,溶解。动物实验确定AMP1,2,3均能明显降低毒血症小鼠的体温，而且炎症相关因子如TNFα, IL-12等的表达显著降低。为确定SPLUNC1 与TLR 的关系，我们首先筛查出高表达TLRs的细胞株进行余下实验，发现LPS刺激后上皮细胞TLR4的表达增加，磷酸化的Akt和NFkB表达也明显增加，而SPLUNC可中和LPS的这一作用，ATRA却可诱导SPLUNC1表达，splunc1过表达可降低LPS引起的TLR4的表达并增加TRAF6的表达，也降低Akt的磷酸化；体外细胞实验也表明，SPLUNC1可降低LPS导致的细胞炎症因子的表达。LPS能增加上皮细胞TLR4的表达，抑制TRAF6的表达，而在SPLUNC1基因转入后，LPS刺激下的TLR4表达明显受到抑制，而TRAF6的表达明显增强，说明SPLUNC1中和了脂多糖的作用。由此我们根据SPLUNC1蛋白设计出了三段具有强烈抗微生物作用的多肽，并确认了其抗微生物的特性与作用机理，进一步阐明了SPLUNC1与Toll样受体及脂多糖的关系。