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基于EMSCs衰老的二补助育汤对高龄鼠子宫内膜容受性调控机制的研究

批准号:
82074480
项目类别:
面上项目
资助金额:
55.0 万元
负责人:
刘雁峰
依托单位:
学科分类:
中医妇科学
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
刘雁峰

项目摘要

结项摘要

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中文摘要
临床寻求IVF-ET帮助的高龄女性日益增多,但妊娠率较低,子宫内膜容受性低是主要影响因素。前期研究证实,名老中医经验方二补助育汤能通过SCF、ανβ3、HOXA-10、eNOS等靶点改善子宫内膜容受性、提高高龄女性IVF-ET妊娠率;现代研究提示,子宫内膜间充质干细胞(EMSCs)可能通过影响子宫内膜细胞更新、组织修复及血管生成,从而参与子宫内膜容受性的建立,而子宫内膜细胞衰老与胚胎着床障碍密切相关。因此,我们提出“二补助育汤通过调控EMSCs衰老,调节子宫内膜容受性,从而提高高龄女性妊娠率”的假说,并以高龄鼠EMSCs为切入点,将体外与体内研究相结合,采用转录组学、CCK8、EDU、SA-β-gal染色法、RT-PCR等方法,证实EMSCs衰老与子宫内膜容受性的相关性,同时研究二补助育汤调控高龄鼠子宫内膜容受性的作用机理,进一步揭示中药提高高龄女性IVF-ET成功率的新作用靶点和机制。
英文摘要
The number of elderly women seeking the help of IVF-ET is increasing, but the pregnancy rate is low and the low endometrial receptivity is the main influencing factor. Erbu Zhuyu Decoction is an experienced Chinese medicine decoction of professor Xiao Chengzong for the treatment of low endometrial receptivity. Previous studies showed that Erbu Zhuyu Decoction could improve endometrial receptivity and pregnancy rate of women's in vitro fertilization and embryo transfer(IVF-ET) through pinopodes, SCF, ανβ3, HOXA-10, eNOS and other targets. Modern research showed that the endometrial mesenchymal stem cells (EMSCs) may participate in the establishment of endometrial receptivity by affecting endometrial cells renewal, tissue repairment and angiogenesis of endometrium.The aging of endometrial cells is closely related to embryo implantation dysfunction. Therefore, the research hypothesized that Erbu Zhuyu Decoction could regulate endometrial receptivity by regulating the aging of EMSCs, so as to improve the pregnancy rate of elderly women. Taking EMSCs as the starting point, combining in vitro and in vivo research, transcriptome, CCK8, EDU, flow cytometry, SA-β-gal staining and RT-PCR were used to confirm the correlation between the aging of EMSCs and endometrial receptivity in this study. To study the mechanism of Erbu Zhuyu Decoction in regulating endometrial receptivity in aged female mice, and further reveal the new targets and mechanisms of TCM in improving the success rate of IVF-ET in elderly women.
临床寻求IVF-ET帮助的高龄女性日益增多,但妊娠率较低,子宫内膜容受性低是主要影响因素。二补助育汤是国医大师肖承悰教授治疗子宫内膜容受性低的经验方,前期临床研究表明,其能明显改善子宫内膜容受性,提高再次IVF-ET妊娠成功率。①本项目选择8-9月龄雌性小鼠作为模型组,模拟高龄女性子宫内膜容受性低状态,应用Real-time PCR、Western blot检测子宫组织容受性标志物HOXA10、LIF的表达,同时分离、提取小鼠EMSCs,应用Real-time PCR、Western blot检测细胞衰老标志物P53、P21的表达,并对两组指标进行相关性分析。结果显示,高龄鼠HOXA10、LIF的表达显著下降,EMSCs细胞P53、P21的表达显著升高,且两组指标呈显著负相关,提示EMSCs衰老可能是导致子宫内膜容受性低的重要因素。②采用不同剂量的二补助育汤、阿司匹林、补佳乐对模型组小鼠进行药物干预,扫描电镜观察子宫内膜胞饮突,检测各组小鼠子宫组织容受性标志物及EMSCs衰老标志物的表达。结果显示,二补助育汤能够上调高龄鼠子宫HOXA10、LIF、整合素αvβ3的表达,促进胞饮突的发育,降低EMSCs细胞P53、P21、P16的表达,延缓EMSCs衰老,从而提高子宫内膜容受性,增加平均胚胎着床位点数,提高妊娠率。③我们进一步以MenSCs为研究对象,采用H2O2诱导MenSCs细胞衰老模型,分别给予二补助育汤冻干粉和PFT-α,SA-β-gal染色检测细胞衰老程度,Real-time PCR、Western blot检测衰老标志物的表达,CCK8、EdU检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期。结果显示,二补助育汤可显著降低H2O2诱导的衰老细胞P53、P21、P16 的表达水平,降低SA-β-gal阳性率,提高H2O2诱导的衰老细胞的细胞活力,增加EdU阳性率,降低G1期细胞百分比。提示二补助育汤可能通过延缓细胞衰老,促进细胞增殖,从而达到改善子宫内膜容受性的作用。综上,本项目以EMSCs衰老为切入点,从子宫内膜组织和子宫内膜细胞层面,逐层证实二补助育汤通过作用于EMSCs衰老从而改善高龄鼠子宫内膜容受性的调控机制,为中药提高高龄女性IVF-ET成功率提供实验及理论依据。
基于围植入期ESCs衰老不充分的二补助育汤对高龄鼠子宫内膜蜕膜化调控机制的研究
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    52万元
  • 批准年份:
    2022
  • 负责人:
    刘雁峰
  • 依托单位:
基于NK/M-CSF/NO通路的二补助育汤调节子宫内膜容受性效应机制相关性研究
  • 批准号:
    81473721
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    75.0万元
  • 批准年份:
    2014
  • 负责人:
    刘雁峰
  • 依托单位:
二补助育汤调节子宫内膜容受性的效应机制及其与SCFmRNA表达相关性研究
  • 批准号:
    81273789
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    72.0万元
  • 批准年份:
    2012
  • 负责人:
    刘雁峰
  • 依托单位:
国内基金
海外基金