miR-122在PGC-1α介导的胰岛素抵抗形成中的调节作用-猫眼课题宝

权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

课题基金

基金详情

miR-122在PGC-1α介导的胰岛素抵抗形成中的调节作用

结题报告

批准号：

81070653

项目类别：

面上项目

资助金额：

31.0 万元

负责人：

项阳

依托单位：

南京大学

学科分类：

H0708.糖尿病

结题年份：

2013

批准年份：

2010

项目状态：

已结题

项目参与者：

王琛、李菁、李捷、侯冬霞、李鹏、张臻、蒋珽、曹晶晶

关键词：

PGC-1a 2型糖尿病 miR-122 胰岛素抵抗

国基评审专家1V1指导中标率高出同行96.8%

中文摘要

构建含PGC-1a 3'-UTR的荧光素酶报告质粒，探明肝特异性miR-122调控PGC-1a的分子机制；分离培养C57BL/6 和 ob/ob小鼠的肝细胞，加入刺激因子，收集含miR-122培养液与骨骼肌细胞共孵育，观察骨骼肌细胞PGC-1a 表达及对糖代谢的影响；Knock down肝细胞miR-122，对比观察共孵育后骨骼肌PGC-1a 表达及对其糖代谢的影响；直接在骨骼肌细胞中过表达miR-122，观察对PGC-1a 表达及糖代谢的影响，Knock down骨骼肌细胞PGC-1a，观察对糖代谢的影响；比较临床2型糖尿病及正常人血浆miR-122的表达差异，与骨骼肌细胞共孵育，观察对PGC-1a 表达及对糖代谢的影响。研究Secreted miR-122在PGC-1a介导的胰岛素抵抗形成中的调节作用。

英文摘要

本实验室前期研究发现2型糖尿病动物模型ob/ob小鼠血清中miR-122的含量较正常C57BL/6小鼠显著升高。本课题进一步研究肝脏特异性miR-122及其靶蛋白AldoA（果糖1,6-二磷酸醛缩酶A）在ob/ob小鼠肝脏代谢中的作用。首先，经qRT-PCR技术检测发现ob/ob小鼠肝脏miR-122水平较C57BL/6小鼠显著下降，而Western blotting分析发现ob/ob小鼠肝脏其靶蛋白AldoA的表达水平显著上升。进一步以miR-122分子转染293T细胞后收集其分泌的microvesicles（MVs），经qRT-PCR检测确认后采用特异性荧光染料DiI-C18标记MVs，以不同剂量尾静脉注射BALB/c小鼠体内，不同时间点取肝组织做冰冻切片，在荧光显微镜下进行形态学观察证实MVs通过循环系统进入肝脏，同时qRT-PCR定量分析发现肝组织中miR-122含量显著升高，而Western blotting检测发现其靶蛋白AldoA在肝脏中表达显著下降。. AldoA主要催化糖酵解途径中果糖1，6-二磷酸和磷酸二羟丙酮及甘油醛-3-磷酸之间的转变，miR-122靶向作用AldoA可能在2型糖尿病的发生发展中发挥重要作用。

期刊论文列表

专著列表

科研奖励列表

会议论文列表

专利列表

A Microarray-based Approach Identifies ADP Ribosylation Factor-like Protein 2 as a Target of microRNA-16