猪caveolin基因家族相互作用蛋白鉴定以及对脂肪与肌细胞胆固醇转运机理的研究

Caveolin (Cav)在胆固醇运输、信号转导和肿瘤抑制中扮演重要角色。本室运用mRNA差异显示技术筛选到在长白与蓝塘猪的背最长肌中具有差异表达的Cav-1。报道显示Cav-1、Cav-2在许多细胞中都有表达，而Cav-3特异表达于肌细胞和心肌中，并对维持肌细胞形态和功能正常具有重要作用。为系统研究Cav家族对脂肪与肌细胞中胆固醇转运的作用机理，本项目拟通过双报告基因技术对该家族启动子进行分析；利用大肠杆菌双杂交系统结合哺乳动物串联亲合层析系统筛选鉴定与之互作的蛋白质；构建该基因家族超表达与RNAi慢病毒载体在脂肪与肌肉细胞中转染，利用基因芯片与双向电泳检测细胞中基因的转录谱与蛋白谱，并对细胞液中胆固醇含量进行检测。本项目从基因表达调控与蛋白互作等角度出发，有助于更系统地揭示猪Cav家族对脂肪与肌细胞中胆固醇转运的作用机制，同时将为控制猪肉胆固醇含量的分子育种提供方案。