1、 MBP联合BCG通过TLR2/TLR4/TLR9 cross-talk直接诱导Th1.本研究以TLRs为切入点，以MyD88依赖途径与TRIF依赖途径为主线，深入探讨MBP联合BCG协同诱导Th1活化的作用机制。通过免疫磁珠纯化小鼠CD4+ T细胞，采用CD3和CD28抗体使之活化，检测MBP和BCG对活化的CD4+ T细胞TLRs通路相关信号分子的影响；并进一步利用TLR2、TLR4抗体和TLR9抑制剂研究TLR及其介导的信号传导分子在Th1活化中的作用。 结果显示MBP联合BCG后，通过显著上调TLR2/TLR9介导的MyD88/TRAF6表达，下调TLR4介导的TRIF/TRAF3表达引起高水平的Th1活化。提示在TLR信号通路中TRAF6上调可促进Th1活化，TRAF3上调则引起相反的作用。此外，我们分别用TLR2/TLR4抗体、TLR9抑制剂和TLR2/TLR4/TLR9激动剂预处理CD4+ T细胞，qRT-PCR实验检测TLR2/TLR4/TLR9的mRNA水平。结果提示在MBP联合BCG诱导的Th1活化中，TLR4可抑制TLR2介导的信号传导；TLR9可促进TLR2和TLR4介导的信号传导，说明三者之间存在crosstalk，并且TLR9在其中发挥关键作用。.2、MBP联合BCG通过TLR2/TLR4诱导DC促进Th1活化.本研究采用TLR2、TLR4基因敲除小鼠，通过体内、体外实验研究结果显示，TLR2、TLR4表达对MBP联合BCG体内免疫小鼠DC细胞共刺激分子表达、促进Th1活化具有重要作用，MBP联合BCG通过TLR2和TLR4诱导DC细胞活化和成熟间接促进Th1增殖与活化。.3、本研究采用小鼠Lewis肺癌模型和小鼠黑色素瘤模型进行研究，结果显示单独BCG或单独MBP对肿瘤的抑制作用不明显，但当MBP联合BCG后，表现出明显的抗肿瘤作用。结合本研究组对二者联合作用的机制探讨发现，MBP和BCG单独尽管也能诱导Th1活化，但联合后Th1活化作用更明显，与抗肿瘤的作用结果呈现一致性，也提示MBP联合BCG免疫后的抗肿瘤作用，与二者协同增强Th1细胞活化有关。