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人巨细胞病毒UL128趋化因子功能鉴定及其致病机制研究

批准号:
81071337
项目类别:
面上项目
资助金额:
35.0 万元
负责人:
尚世强
依托单位:
学科分类:
疱疹病毒与感染
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
陶然、孙越峰、陈英虎、吴亦栋、吴鼎文、段群军、吴蔚、郑琪

项目摘要

结项摘要

项目成果

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中文摘要
先天性耳聋是最常见的出生缺陷,HCMV是导致感染性先天性耳聋最主要的病原体,但其致聋机制尚不明确。研究表明GPCMVβ-趋化因子在病毒相关性耳聋发病中起重要作用。HCMV UL128具有β-趋化因子结构特征,但尚无功能鉴定及在先天性耳聋中致病作用的报道。我们的预实验显示,转染UL128表达载体的细胞培养上清对PBMC有明显趋化作用。本项目拟在此基础上,首先构建UL128重组蛋白的稳转细胞表达体系;然后从结合趋化因子受体、激活信号转导通路、体外趋化人PBMC及对PBMC凋亡和胞内钙离子浓度的影响等方面鉴定UL128的趋化因子功能;进一步用UL128高表达和抑制表达的HCMV分别感染人内耳感觉上皮和PBMC共培养模型,研究两者在致细胞炎症反应上的差异,揭示UL128在HCMV相关性耳聋发病机制中的作用。本项目将为深入探索HCMV相关性耳聋的发病机制提供新思路,为抗HCMV药物研发提供新靶标。
英文摘要
本项目如期、圆满完成所有研究计划,取得下列研究成果:(1) 成功构建UL128重组蛋白(rUL128)真核表达系统,纯化获得分子量约为26KD的rUL128,浓缩得到浓度为0.1mg/ml的目的蛋白,实现HCMV UL128基因体外高效、稳定的表达;(2) 体外趋化试验证实rUL128(100ng/ml)具有与人β-趋化因子相似的趋化PBMC的作用,且无明显浓度依赖性,免疫组化结果显示rUL128具有结合PBMC胞膜受体的功能,浓度为50ng/ml和100ng/ml的rUL128均可使PBMC胞内Ca2+浓度呈现短暂升高,rUL128蛋白具有活化PBMC的功能;(3) 成功分离获得耳蜗感觉上皮细胞及原始祖细胞,成功构建HCMV感染耳蜗上皮细胞模型;(4) HCMV野生病毒株感染组织细胞与PBMC共培养体系,致共培养上清炎症因子IL-6、TNF-α释放明显增加,且IL-6的表达具有时间累积效应,RNA干扰获得的UL128缺陷病毒株致PBMC炎症因子释放能力明显削弱。本项目已发表SCI收录论文3篇和中文综述1篇,参加全国性学术会议并在会上作口头报告2次,培养博士研究生1名。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI: --
发表时间: 2012
期刊: Viral Immunology
影响因子: 2.2
作者: [Qi Zheng, Ran Tao, Huihui Gao, Jun Xu, Shiqiang Shang, Ning Zhao]
通讯作者: Ning Zhao
Genetic polymorphisms and serum levels of mannose-binding lectin in Chinese pediatric patients with common infectious diseases
中国儿童常见传染病患者甘露糖结合凝集素基因多态性及血清水平
DOI: 10.1016/j.ijid.2012.01.014
发表时间: 2012-05-01
期刊: INTERNATIONAL JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES
影响因子: 8.4
作者: [Tao, Ran, Hua, Chun-Zhen, Shang, Shi-Qiang]
通讯作者: Shang, Shi-Qiang
Recombinant HCMV UL128 expression and functional identification of PBMC-attraction activity in vitro
重组 HCMV UL128 表达和体外 PBMC 吸引活性的功能鉴定
DOI: --
发表时间: 2013
期刊: Archives of Virology
影响因子: 2.7
作者: [Gao Hui-hui, Tao Ran, Zheng Qi, Xu Jun, Shang Shi-qiang]
通讯作者: Shang Shi-qiang
DOI: --
发表时间: 2012
期刊: Viral Immunology
影响因子:
作者: [Qi Zheng, Ran Tao, Huihui Gao, Jun Xu, Shiqiang Shang, Ning Zhao, ]
通讯作者:
宿主环状RNA hsa_circ_0094088通过病毒miRNA调控人巨细胞病毒增殖的 相关机制研究
  • 批准号:
    81971422
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55.0万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    尚世强
  • 依托单位:
lncRNA4.9介导的NAB2对EGR1-IE2的调控在人巨细胞病毒潜伏感染中的作用及其机制
  • 批准号:
    81671495
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    57.0万元
  • 批准年份:
    2016
  • 负责人:
    尚世强
  • 依托单位:
人巨细胞病毒潜伏感染的自噬调控及相关IE2-Akt-Beclin 1通路的作用机制
  • 批准号:
    81370774
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    70.0万元
  • 批准年份:
    2013
  • 负责人:
    尚世强
  • 依托单位:
甘露聚糖结合凝集素(MBL)阻断HCMV侵入靶细胞机制的研究
  • 批准号:
    30872240
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    33.0万元
  • 批准年份:
    2008
  • 负责人:
    尚世强
  • 依托单位:
国内基金
海外基金