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结核分枝杆菌螺旋酶GyrB与GyrA相互作用的机理研究
结题报告
批准号:
31070685
项目类别:
面上项目
资助金额:
34.0 万元
负责人:
黄友谊
依托单位:
学科分类:
C0502.分子生物物理
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
张华、陈颖玉、刘曼莉、王艳、宋辉、玉王宁
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中文摘要
全球结核病重新爆发并急剧恶化,严重威胁到人类的健康,亟需了解结核菌的生命活动调控机制,阐明结核菌的致病机理,为结核病的防治提供理论依据。螺旋酶(DNA gyrase)在DNA复制、转录等关键生命过程中具有重要调控作用,而螺旋酶A亚基(GyrA)与B亚基(GyrB)间的相互作用是组装成具有生物活性全酶的基础,但目前这方面缺乏研究。我们一直在开展结核分枝杆菌螺旋酶和Topo I的研究,已通过酵母双杂交技术发现了结核分枝杆菌螺旋酶GyrB与GyrA相互作用的区域,拟通过突变、SPR仪等方法分析GyrB与GyrA相互作用的特性、活性位点以及对螺旋酶结合DNA、酶功能等方面的影响,阐明GyrB与GyrA相互作用的机理,深入探讨GyrB与GyrA相互作用对螺旋酶催化功能的作用,以利于阐明螺旋酶的催化机理和在关键生命活动过程中的调控机制,为揭示结核分枝杆菌致病机理和进行新药开发提供基础。
英文摘要
结核病的主要致病菌为结核分枝杆菌,而螺旋酶是调控生命活动过程的关键酶。螺旋酶是由A亚基(GyrA)与B亚基(GyrB)相互作用组装成具有生物活性的全酶,但目前缺乏二者相互作用组装机理的研究。本项目通过分别构建结核分枝杆菌螺旋酶B亚基C端和N端的系列突变体,通过酵母双杂交、GST-Pull down和SPR等技术方法首次发现Toprim是结核分枝杆菌螺旋酶GyrB与GyrA相互作用的关键结构域,而第531-550和548-564位氨基酸在Toprim域中对GyrB与GyrA的相互作用发挥关键作用,此外发现GyrB的N端对GyrB与GyrA的相互作用有调控作用。本研究顺利完成了预定的研究内容,有利于阐述螺旋酶重组和催化机制,并可为药物设计提供靶标,以促进结核病的防治。
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
云南大叶种多酚氧化酶高活性机理研究
  • 批准号:
    31270731
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    78.0万元
  • 批准年份:
    2012
  • 负责人:
    黄友谊
  • 依托单位:
结核分枝杆菌拓扑异构酶I的DNA结合机理研究
  • 批准号:
    30700144
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    16.0万元
  • 批准年份:
    2007
  • 负责人:
    黄友谊
  • 依托单位:
国内基金
海外基金