健脾活血补肾汤通过下调IL- 17表达干预诱导培养的破骨细胞的增殖、凋亡及其分泌MMP-3、OPG及RANK的功能. [摘要] 目的：观察健脾活血补肾汤含药大鼠血清体外对AS患者外周血单个核细胞（PBMC）IL- 17表达及对AS患者破骨细胞（OC）的增殖与凋亡及其表面分子的表达水平的影响，从而探讨健脾活血补肾汤修复强直性脊柱炎（AS）骨质破坏的可能机制。方法： 1.制备不同浓度健脾活血补肾汤大鼠含药血清;2 用ELISA方法检测体外培养的PBMCs上清液中IL-17水平;3将采集患者的PBMCs接种于预置爬片或骨片的24孔培养板中,用HE染色显示细胞形态;采用TRAP染色法鉴定诱导成功的破骨细胞;4取出共培养的骨片,室温染色5 min,蒸馏水冲洗后光镜下观察吸收陷窝，并进行拍照和计数。5 诱导培养的OC经不同浓度健脾活血补肾汤分别培养不同时间后，用ELISA法检测各组培养上清中MMP-3、OPG及RANK表达水平。结果：1.空白对照组的破骨细胞胞浆饱满,核仁清晰。实验各组的破骨细胞胞浆浓缩,有的细胞出现核碎裂；2. 经高、中、低三组浓度大鼠含药血清培养72h后,各组OC细胞数均较对照组减少，且其差异有统计学上意义(P<0.05)； 且各组OC凋亡率均较空白对照组高,且其差异均有统计学意义(P<0.05)；各组骨吸收陷窝面积也均较空白对照组小,且其差异均有统计学意义(P<0.05)；3. 高、中两剂量组AS患者PBMCs上清液中IL-17水平与对照组相比显著下降，且差异有统计学意义（P<0.01）,但各组含药大鼠血清对健康自愿者PBMCs上清液中IL-17表达水平的影响与对照组相比，其差异没有统计学意义（P>0.05）；6. AS患者OC上清中MMP-3、RANK水平均较对照组明显降低,且其差异具有统计学意义(P<0.05); 而OPG水平均较对照组高,且其差异有统计学意义(P<0.05)。结论：健脾活血补肾汤可能通过减少OC增殖、促进其凋亡，纠正其表面分子OPG\RANK表达失衡，从而修复炎性损伤所致的AS患者关节的骨质破坏。且其潜在的作用机制可能与下调炎症因子IL-17的表达有关。.总之，基本上按照标书的要求完成了本研究课题，只是由于实验条件的限制，更改了部分指标的检测方法，但不影响研究结论的可靠性。.