人胚胎干细胞向生殖细胞的定向分化与调控

本研究以人胚胎干细胞细胞系H1为研究对象, 在影响干细胞分化的最重要的两个方面-干细胞微环境/niche和基因调控，即内外源性调节两方面进行全方位研究。体外利用骨形态形成蛋白BMP-4和视黄酸RA分阶段诱导分化，与不同的细胞外基质蛋白纤维连接蛋白FN和层粘连蛋白LN联合，模拟体内微环境，构建一有效的体外生精分化模型体系。利用特异性抗原采用MACS方法将目的细胞群筛选，并将遗传学和超微结构分析贯穿于各个环节，探索诱导hES细胞和筛选原始生殖细胞PGCs样细胞群的条件。同时在细胞和分子水平上阐明hES向PGCs分化中的基因调控和信号传导机制。利用Real-time PCR和RNAi等技术检测筛选基因并对其功能进行分析。最后采用裸鼠和新生小鼠体内移植模型，进一步验证体外研究。上述研究对探讨干细胞向生殖细胞分化，以及对生育治疗的前沿研究和发展新的生殖工程学提供开创性思路。