亚硝酸盐胁迫下短乳杆菌BS6中GlnR与Nir相互作用及表达调控机制
批准号:
31360372
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
50.0 万元
负责人:
徐波
依托单位:
学科分类:
C2003.食品微生物学
结题年份:
2017
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
郭晓燕、陈瑶、王园秀、钟平安、江湖、熊维娜、应碧、张三燕
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中文摘要
利用亚硝酸盐还原酶(Nir)降解发酵食品中产生的亚硝酸盐,是应对亚硝酸盐污染的根本对策。本项目组前期研究了Lactobacillus brevis BS6转录调控子glnR的结构功能和GlnR对GAD调控机制,构建了glnR缺失菌株和回补质粒,并分析了该菌株在亚硝酸盐胁迫下降解亚硝酸盐特性和nir部分保守片段。glnR是乳酸菌氮代谢中的关键转录调控子, 有关乳酸菌nir操纵子的转录和表达调控机制尚不清楚(尚未见报道)。据此,本项目拟从TAIL-PCR克隆nir操纵子全长基因及其结构和功能分析着手,研究亚硝酸盐胁迫下GlnR对nir操纵子转录水平和表达的调控,确立nir启动子与GlnR结合特性和相互作用,为进一步揭示乳酸菌nir操纵子调控系统的功能及模式元件的组合、新的调控模型和信号传导的分子调控机制奠定基础,这对加快寻找安全有效的亚硝酸盐生物降解法,进而保障国家的食品安全具有重要意义。
英文摘要
The utilization of Nitrite reductase (Nir) degradation in fermented food is the ultimate countermeasures to deal with the pollution of the nitrite. In the preliminary studies, we have studied the structure and function of transcriptional regulator glnR of Lactobacillus brevis BS6 and the GAD-control mechanism by the GlnR, built the glnR deletion mutant and the revertant plasmid, and analyzed the characteristic of degradation nitrite by the strain under the nitrite stress and the part conservative fragment of nir gene from L. brevis BS6. Because the glnR is the key transcriptional regulator in the lactic acid bacteria nitrogen metabolism and the nir operon transcription and expression regulation mechanism is unclear, the full-length of nir operon will be amplified by TAIL-PCR and the structure and function of nir operon will be analyzed firstly, then the nir operon transcriptional level and expression regulation by the transcriptional regulator GlnR under the nitrite stress will be studied, the nir promoter with the GlnR binding properties and interactions will be established in this project finally. This study would establish the foundation of the functions of nir operon regulation system, the combination of mode components, and the molecular regulation mechanism of the new regulation model and the signal transduction of lactic acid bacteria for the further study. All these studies would be great significance for looking for a safe and effective control or degradation of nitrite by biodegradable method quickly and for guaranteeing the food security of our country.
利用亚硝酸盐还原酶(Nir)降解发酵食品中产生的亚硝酸盐,是应对亚硝酸盐污染的根本对策。本项目组前期研究了短乳杆菌BS6转录调控子glnR的结构功能和GlnR对GAD调控机制,并分析了该菌株在亚硝酸盐胁迫下降解亚硝酸盐特性和nir部分保守片段。glnR是乳酸菌氮代谢中的关键转录调控子, 但有关乳酸菌nir操纵子的转录和表达调控机制尚不清晰。为此,本项目首先研究了亚硝酸盐胁迫下短乳杆菌BS6亚硝酸盐还原酶酶学性质并实现了该酶的食品级高效诱导表达,然后在GlnR与Nir启动子体外相互作用的研究中,通过细菌单杂交和凝胶阻滞探索到了nir操纵子的转录起始位点和全局性转录调控蛋白GlnR与启动子结合的特异性,确定了调控蛋白在启动子序列中特异识别序列,并利用qRT-PCR阐释了亚硝酸盐胁迫下短乳杆菌BS6的GlnR对nir的调控规律和亚硝酸盐胁迫下GlnR对nir操纵子表达和基因转录水平的调控机制。在利用重叠延伸PCR技术敲除了Nir基因后,酵母双杂交实验进一步阐释了Nir和glnr的相互作用机制。本研究旨在阐释乳酸菌nir操纵子的分子调控机制和加快寻找安全有效的亚硝酸盐生物降解法提供理论基础。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2014
期刊:生物技术进展
影响因子:--
作者:江湖;田健;应碧;伍宁丰;徐波
通讯作者:徐波
DOI:DOI:10.1371/journal.pone.0171111
发表时间:2017
期刊:PLOS ONE
影响因子:3.7
作者:Xiaoyu Chang;Bo Xu;Yingguo Bai;Huiying Luo;Rui Ma;Pengjun Shi;Bin Yao
通讯作者:Bin Yao
The study of food-grade induced expression and enzymatic properties of L-Arabinose Isomerase from Lactobacillus plantarum WU14 with high D-tagatose yield
高D-塔格糖产量植物乳杆菌WU14中L-阿拉伯糖异构酶的食品级诱导表达和酶学特性研究
DOI:10.4236/fns.2016.74034
发表时间:2016
期刊:Food and Nutrition Sciences
影响因子:--
作者:Xiaoyu Chang;Bi Ying;Yanli Zhang;Huifang Cao;Tong Zhou;Ping'an Zhong;Bo Xu
通讯作者:Bo Xu
DOI:--
发表时间:2015
期刊:中 国 食 品 学 报
影响因子:--
作者:徐波;熊维娜;李烨青;周通;刘志文;应碧;郭晓燕
通讯作者:郭晓燕
DOI:--
发表时间:2015
期刊:中国农业科学
影响因子:--
作者:应碧;昌晓宇;刘志文;周通;陈瑶;钟平安;徐波
通讯作者:徐波
Fnr参与植物乳杆菌WU14亚硝酸盐降解的调控机制
- 批准号:31760438
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:38.0万元
- 批准年份:2017
- 负责人:徐波
- 依托单位:
全局性负调控蛋白GlnR对短乳杆菌GAD调控机制的研究
- 批准号:31060208
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:25.0万元
- 批准年份:2010
- 负责人:徐波
- 依托单位:
国内基金
海外基金















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