miRNAs在胰腺癌耐药调控网络中的作用机制研究

研究背景：miRNA对胰腺癌干细胞、EMT 的异常调控可能是导致胰腺癌化疗耐药的重要因素，本课题主要探索耐药相关miRNA在自噬-EMT-肿瘤干细胞-化疗耐药调控网络中的作用和机制。方法：通过体内体外实验研究miRNA对胰腺癌细胞化疗敏感性、自噬活性、EMT表型及胰腺癌干细胞的调控作用， 探索miRNA调控胰腺癌化疗耐药的靶基因及相关信号通路，阐述miRNA 作为治疗靶点的潜在价值。同时检测人胰腺癌组织标本中miRNA表达水平，评估miRNA 作为胰腺癌预后指标的临床应用价值。结果：①miR-497可增加胰腺癌细胞对化疗药物的敏感性，抑制肿瘤细胞的增殖、迁移及侵袭和促进凋亡，并下调胰腺癌干细胞标志物的表达；miR-497调控化疗耐药的分子机制是通过抑制其靶基因IGF-1R、Pim-1、FGF2及FGFR1的表达进而抑制IGF-1R/AKT、AKT/mTOR和RAS/ERK信号通路的激活；进一步深入研究发现，miR-497调控胰腺癌干细胞标志物的表达变化的机制可能是通过Pim-1\EGFR通路介导，抑制Pim-1的表达可下调胰腺癌干细胞标志物的表达；miR-497表达水平与Pim-1表达水平存在负相关性，miR-497在癌组织中的表达降低，Pim-1在癌组织中的表达升高，miR-497低表达和Pim-1高表达是患者预后不良的独立危险因素。同时，胰腺癌患者血浆Pim-1的表达水平具有辅助诊断价值。②miR-10a-5p可降低胰腺癌细胞对化疗药物的敏感性，促进细胞的迁移及侵袭，并调控胰腺癌细胞EMT、肿瘤干细胞和自噬活性相关蛋白的表达；同时，miR-10a-5p调控胰腺癌化疗耐药的机制可通过抑制其靶基因TFAP2C从而抑制EMT驱动因子ZEB1、Snail及Slug等表达介导；进一步深入研究发现，miR-10a-5p调控胰腺癌细胞EMT 的机制可能是通过TFAP2C\c-Myc通路介导，抑制TFAP2C的表达可下调胰腺癌EMT标志物的表达。结论：①miR-497/Pim-1通路参与调控胰腺癌化疗耐药机制与肿瘤干细胞相关，miR-497/Pim-1可以作为胰腺癌潜在的治疗靶点和判断患者预后的肿瘤标志物。②miR-10a-5p/TFAP2C通路参与调控胰腺癌化疗耐药机制与EMT相关，miR-10a-5p/TFAP2C可以作为胰腺癌潜在的治疗靶点。