小麦春化过程中VER2与TaSPY蛋白互作关系的研究

已有结果表明VER2在小麦春化过程中主要定位于细胞核，而脱春化后定位于细胞质；利用酵母双杂交技术筛选到一种新的SPY蛋白，命名为TaSPY，初步结果表明VER2与TaSPY之间存在相互作用。生物信息学分析结果表明，TaSPY可能通过对VER2蛋白氨基酸序列的特定位点进行翻译后水平的糖基化修饰，导致VER2蛋白的糖基化与磷酸化修饰状态之间相互转变，进而影响VER2的核定位从而响应春化信号转导过程。本项目拟在现有工作的基础上，通过原核表达纯化TaSPY蛋白并制备抗体，研究TaSPY这一新的植物SPY蛋白的生化特性及响应春化过程时的表达定位特征，用酵母双杂交、免疫共沉淀结合免疫印迹等方法对VER2与TaSPY之间的相互作用关系进行验证，运用点突变、蛋白质谱分析，结合转基因方法深入研究VER2与TaSPY互作的位点及作用模式。该研究对于在蛋白水平阐明春化作用的分子机理具有重要的理论意义。