骨肉瘤相关的IL-12家族基因筛查及作用机制研究

骨肉瘤是骨科中最常见的恶性肿瘤之一，白细胞介素-12家族细胞因子(IL-12、IL-23和IL-27)参与了骨肉瘤发生的病理生理过程。本课题组以此为切入点，对IL-12家族基因在骨肉瘤发生、发展中的分子作用机制进行研究。研究的内容主要包括：①采用PCR-RFLP法分析IL-12位点rs568408、rs2243115和rs3212227及IL-27基因-964 A/G，2905T/G，和4730 T/C多态性与骨肉瘤的相关性。②采用单碱基延伸的聚合酶链反应技术检测广西壮族人群白细胞介素-27( IL-27)基因rs181206C/T位点的分布特点及其与不同地区和种族人群的差异。③采用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)分别检测血清IL12、IL27水平在骨肉瘤患者的表达情况。结果：①IL-12 rs568408和rs3212227位点多态性与骨肉瘤存在相关性，可能是骨肉瘤易感性的一个遗传位点标记。IL-27-964A/G，2905 T/G，4730T/C基因多态性及其单倍型可能与骨肉瘤易患风险无关。②广西壮族人中，检出rs181206C/T 位点有3 种基因型，分别为CC、CT和TT。IL-27基因rs181206C/T位点最常见的基因型是TT(75.1%)，最常见的等位基因型是T( 85.7%)。男性及女性间IL-27基因rs181206多态性位点基因型及等位基因频率比较，差异无统计学意义( P＞0.05)。提示，IL-27基因rs181206C/T位点基因型和等位基因频率在广西壮族人群中的分布与其他种族和地区人群相比有差异。③骨肉瘤组患者血清IL-12水平明显低于对照组（P<0.01）。在骨肉瘤患者中处于肿瘤发病Ⅲ-Ⅳ期的患者其血清IL-12水平低于Ⅰ-Ⅱ期患者（P<0.05）；合并远处转移的患者血清IL-12水平低于不发生远处转移的患者（P<0.05）；同时,IL-27与肿瘤的临床分期和是否有转移明显相关，处于肿瘤发病Ⅲ-Ⅳ期的患者其血清IL-27水平低于Ⅰ-Ⅱ期患者(P＜0. 01)，合并远处转移的患者血清IL-27水平低于无远处转移的患者(P＜0.01)。表明血清IL-12及IL-27水平在骨肉瘤患者表达异常，提示其在骨肉瘤的发生中可能起免疫调节作用。因此，研究IL-12家族基因在骨肉瘤发生、发展中的分子作用机制，为临床建立起早期骨肉瘤的诊断方法提供理论依据。