昆虫可溶型海藻糖酶（Tre-1）异源表达及与植物源抑制剂的互作研究

海藻糖酶是昆虫能量代谢的核心酶，其催化昆虫的血糖---海藻糖分解为葡萄糖。而高等动物中的血糖为葡萄糖，因此其作为杀虫剂作用靶标的研究备受关注。本项目从棉铃虫中肠中分离了一条可溶型海藻糖酶（Tre-1）基因，从东亚飞蝗中分离出一条膜结合型海藻糖酶（Tre-2）基因。针对Tre-1成功构建了表达载体，获得具有高催化活性的上清蛋白，对该重组蛋白进行了酶学特性和动力学分析。通过对棉铃虫中肠纯化Tre-1蛋白的动力学和化学修饰确定了其活性中心的组成。抑制剂的研究主要采用动力学、化学修饰、荧光光谱分析针对昆虫活体、离体的海藻糖酶以及重组的蛋白进行研究，明确了3种分别属于不同类型抑制效果好的植物源抑制剂进行了离体和活体抑制效果，抑制类型和抑制机理研究以及不同抑制剂对Tre-1和Tre-2的抑制效果的差异。本研究还首次筛选获得一株能产生表面活性剂的伯克氏菌属微生物并已经获得国家发明专利，为研发高效低毒有选择性的天然杀虫剂奠定基础。