七鳃鳗是无颌类脊椎动物，是研究生物起源与进化的"活化石"。我们在前期研究中发现七鳃鳗的HMG蛋白家族成员HMGB1(high mobility group box 1)，它是连接细胞核内蛋白表达、炎症反应及机体免疫之间的桥梁。但在七鳃鳗中HMGB1功能尤其免疫方面研究尚未阐明，因此本课题要明确HMGB1在无颌类脊椎动物中免疫学功能以及促炎反应的信号转导通路。将七鳃鳗HMGB1基因成功构建到真核表达载体pIRES2-AcGFP1-Nuc上。将重组质粒pIRES2 AcGFP1-Nuc-HMGB1转染Hela细胞和七鳃鳗类淋巴细胞，利用倒置荧光显微镜直接观察表达情况，免疫印迹法确定质粒转染后HMGB1表达量上调。通过实时定量PCR法检测经重组HMGB1真核表达质粒转染七鳃鳗类淋巴细胞后，MIF和IL-17 mRNA表达量显著上调，提示HMGB1蛋白可以调控细胞因子MIF和IL-17的表达。为了研究七鳃鳗HMGB1的生物学功能，首先检测HMGB1蛋白与DNA的结合能力，纯化的rLj-HMGB1通过与七鳃鳗GAPDH的多聚核苷酸（101 bp和12 bp）反应，采用凝胶电泳迁移实验（EMSAs）分析发现重组人HMGB1蛋白和重组七鳃鳗HMGB1都可以使DNA泳动速度减慢，并呈剂量依赖关系，并且验证rLj-HMGB1蛋白可以保护pEGFP-N1质粒DNA免遭DNaseI降解。通过ELISA实验发现，rLj-HMGB1可促进THP-1单核细胞释放TNF-α，在培养24小时后分泌的TNF-α量达到最高。之后，TNF-α水平开始下降，并在48小时降到最高值的50％。用重组人HMGB1蛋白和LPS作为阳性对照，发现也都可以诱导THP-1细胞释放TNF-α产生。为了排除大肠杆菌中内毒素导致TNF-α释放，加入了阴性对照His-标签蛋白（Lj-HBP1），发现Lj-HBP1蛋白没有导致TNF-α的释放。这些实验结果表明，rLj-HMGB1可诱导THP-1单核细胞释放炎性细胞因子。