应用Gateway技术构建Survivin、TGFβ3和TIMP-1三克隆系统并转染抑制椎间盘退变

椎间盘退变继发的腰椎间盘突出、椎管狭窄等疾病是腰腿疼痛的主要病因，而如何延缓椎间盘退变，目前尚无突破性进展。本课题针对椎间盘退变机制选定目的基因利用转染技术探究延缓椎间盘退变的作用。研究了survivin基因在椎间盘中的表达及其在对促进细胞增殖及抑制细胞凋亡的作用，明确了survivin在髓核退变机制中起到一定作用，为survivin基因治疗奠定理论基础。进而探究了慢病毒介导survivin单基因体外转染对髓核细胞形态的影响。基于重组质粒构建技术，成功利用“自剪切多肽2A”建立共表达载体，并有效地包装含有不同目的基因的慢病毒，为基因转染提供良好工具。研究发现了TGFβ3和TIMP-1双基因转染髓核细胞有延缓退变的作用，而survivin、TGFβ3及TIMP-1共转染时无延缓作用。同时，进行了survivin、TGFβ3及TIMP-1体内共转染退变髓核的动物实验，证实其积极作用。此外，研究人颈椎后纵韧带交感神经纤维形态及分布，由此推测这些交感神经分布的意义，继而讨论基因治疗的可能性。