利用宏基因组文库和微生物菌种库构建高效转化制备L-DOPA的酪氨酸酶体系

L-DOPA(左旋多巴)是用于治疗帕金森症最有效的药物，目前全球每年消耗约 408吨且复合增长率达到年均13%，工业化生产中现有的方法无法满足这一需求，因此寻找更高效的生产方法是现今的热点之一。多年研究发现，运用酪氨酸酶转化制备L-DOPA是最具潜力的途径，现已有研究者对该方法进行了探索。本课题用HPLC检测取代传统的紫外检测方法，进一步完善了L-dopa的定量检测。建立了高效的筛选方法-乳酸亚铁平板筛选法。以米曲霉为原始菌，通过紫外和NTG诱变的方法将L-dopa的产量由19.5%提高到了53.7%，建立了以米曲霉菌体为酶供体的反应体系，还对工业化生产的条件进行了初步优化。此外，根据文献和专利报道，从本课题组宏基因组文库中获得酶4-Hydroxyphenylacetate 3-Hydroxylase，该酶具有生成L-dopa的功能，并以大肠杆菌为载体，对其进行表达和反应条件的初步摸索。该课题已发表SCI论文6篇。