核酸适体RCC-H1b对肾癌识别和细胞核定位的研究
结题报告
批准号:
31701249
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
25.0 万元
负责人:
胡小晓
依托单位:
学科分类:
C0701.细胞器及亚细胞结构、互作与功能
结题年份:
2020
批准年份:
2017
项目状态:
已结题
项目参与者:
陈浩文、龙禹乾、张晶、彭程、张慧
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中文摘要
癌症是全球范围内严重危害人类健康的疾病。为了获得特异性识别肾癌的核酸适体,我们合成了swan文库,以人肾透明细胞癌细胞系786-O为靶细胞,以人肾成纤维细胞系KFB为对照细胞,进行流式结合验证。我们发现RCC-H1能特异性结合786-O,序列优化后的RCC-H1b具有核定位现象。为了考察RCC-H1b在复杂生物环境下的识别性能,我们表征了RCC-H1b分别与临床病理石蜡组织芯片和小鼠活体肿瘤的结合情况,发现它对病人癌组织和裸鼠RCC移植瘤都能保持良好的识别能力。目前肾癌的肿瘤标志物较少,无特异性,且用途不广,因此发现肾癌新的分子探针和肿瘤标志物十分有必要,我们拟通过生物质谱、SERS、shRNA慢病毒、流式细胞术、SDS-PAGE、western blot等技术开展研究,初步鉴定RCC-H1b在肾透明细胞癌中结合的蛋白靶标,及探讨RCC-H1b细胞核定位的分子机制。
英文摘要
Cancer is a serious worldwide human disease. In order to obtain an novel aptamer for the specific recognition of renal cell carcinoma, we synthesized a "swan" library, and applied flow cytometry experiments with the human renal clear cell carcinoma cell line 786-O as the target cell and the human renal fibroblast cell line KFB as the control cell. We found that RCC-H1 specifically binds to 786-O, and its optimized sequence RCC-H1b displays a nuclear localization. In order to investigate the recognition properties of RCC-H1b in complex biological environment, we also tested its binding abilities to clinicopathological paraffin tissue microarray and mouse RCC- xenografted tumor and found that it can identify both specifically. At present, the tumor biomarkers of renal cell carcinoma are few, non-specific, and not widely used, so it is necessary to find new molecular probes and tumor biomarkers. With these technologies, including LC-MS/MS, SERS, shRNA lentivirus, flow cytometry, SDS-PAGE, western blot and so on, we plan to identify the target protein that RCC-H1b binds to and further explore the molecular mechanism of RCC-H1b nuclear localization.
肾癌是一种常见的恶性肿瘤,由于缺乏特定的肿瘤标记物,主要采用影像学检查进行肾癌诊断。我们通过将肾癌786-O细胞与swan文库共孵育,前期已经筛选出可以特异性结合肾癌细胞的核酸适体RCC-H1b。我们发现核酸适体具有明显核定位现象,并且能抑制细胞周期和促进细胞凋亡,见已发表论文。首先通过流式细胞术考察RCC-H1b与不同类型内吞抑制剂处理786-O细胞的流式结合情况,我们初步判断RCC-H1b 结合靶标类型为蛋白,并且可能通过细胞松弛素D和M-b-CD介导内吞作用。我们进一步通过Aptamer pulldown实验核酸适体RCC-1b与786-O细胞潜在的结合蛋白,然后进行质谱分析和确认出差异条带nap1l4蛋白。最后通过慢病毒干扰实验进行验证靶蛋白。本课题将实现加对核酸适体RCC-H1b在786-O中的结合靶标和入核机制的深入理解,大力推进加核酸适体RCC-H1b在肾透明细胞癌的识别和治疗的应用,并将为核酸适体的生物功能研究这个方向注入创新动力。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:10.1021/jacs.8b10795
发表时间:2019
期刊:Journal of the American Chemical Society
影响因子:15
作者:Zhang Lili;Abdullah Razack;Hu Xiaoxiao;Bai Huarong;Fan Huanhuan;He Lei;Liang Hao;Zou Jianmei;Liu Yanlan;Sun Yang;Zhang Xiaobing;Tan Weihong
通讯作者:Tan Weihong
DOI:10.2174/0929867327666200605153919
发表时间:2020
期刊:Current Medicinal Chemistry
影响因子:--
作者:Liu Yunyi;Ou Hailong;Pei Xiaming;Jiang Bin;Ma Yihan;Liu Naiyu;Wen Chaoqi;Peng Chen;Hu Xiaoxiao
通讯作者:Hu Xiaoxiao
Aptamer-functionalized nanoscale metal-organic frameworks for targeted photodynamic therapy.
用于靶向光动力治疗的适体功能化纳米级金属有机框架
DOI:10.7150/thno.26768
发表时间:2018
期刊:Theranostics
影响因子:12.4
作者:Meng HM;Hu XX;Kong GZ;Yang C;Fu T;Li ZH;Zhang XB
通讯作者:Zhang XB
DOI:--
发表时间:2019
期刊:激光生物学报
影响因子:--
作者:彭程;文超琪;刘乃瑜;刘匀毅;马艺菡;裴夏明;胡小晓
通讯作者:胡小晓
In Vivo Monocyte/Macrophage-Hitchhiked Intratumoral Accumulation of Nanomedicines for Enhanced Tumor Therapy
体内单核细胞/巨噬细胞搭便车在瘤内积累纳米药物以增强肿瘤治疗
DOI:10.1021/jacs.9b11046
发表时间:2020
期刊:Journal of the American Chemical Society
影响因子:15
作者:Zheng Liyan;Hu Xiaoxiao;Wu Hui;Mo Liuting;Xie Sitao;Li Jin;Peng Cheng;Xu Shujuan;Qiu Liping;Tan Weihong
通讯作者:Tan Weihong
新型SWL-3/SWL-3b吉西他滨载药体系用于膀胱癌靶向治疗研究
  • 批准号:
    2023JJ30124
  • 项目类别:
    省市级项目
  • 资助金额:
    0.0万元
  • 批准年份:
    2023
  • 负责人:
    胡小晓
  • 依托单位:
核酸适体S11e对纤维肉瘤的分子识别和抗肿瘤作用机制研究
  • 批准号:
    31970692
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    58.0万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    胡小晓
  • 依托单位:
核酸适体RCC-H1b对肾癌识别和细胞核定位的研究
  • 批准号:
    2018JJ3037
  • 项目类别:
    省市级项目
  • 资助金额:
    0.0万元
  • 批准年份:
    2018
  • 负责人:
    胡小晓
  • 依托单位:
国内基金
海外基金