帕金森病是第二高发的神经退行性疾病，其病理特征是中脑黑质多巴胺能神经元的变性、死亡，但是多巴胺能神经元死亡的分子机制不明，目前临床主要是对症治疗，尚缺乏有效的对多巴胺能神经元有保护作用的药物。文献报道，升高SIRT1的活性或抑制SIRT2的活性，对帕金森病模型多巴胺能神经元具有一定的保护作用。但是在帕金森病中二者活性的变化及调节，其活性改变对神经元的作用，是通过何靶分子实现的，目前尚无报道。本课题研究SIRT2的活性是怎样被调控的。.首先我们通过体外激酶实验证明了磷酸激酶GSK3beta和CDK5均可以磷酸化SIRT2，GSK3beta可能磷酸化Sirt2上的三个磷酸化位点。免疫共沉淀实验证明GSK3beta 和SIRT2在细胞内可以直接结合。我们在 H4细胞中MPP+处理后，检测SIRT2含量和活性，发现细胞内SIRT2含量有一过性增加，其底物乙酰化H4下降。为了检测SIRT2在细胞内是否被GSK3beta磷酸化，我们制备了该三个磷酸化位点特异性的SIRT2抗体，检测细胞在神经毒素刺激下SIRT2磷酸化的改变。在培养的SH-SY5Y细胞中，6-羟多巴胺可以使胞浆中乙酰化tubulin降低，而胞核中乙酰化H3升高；GSK3beta活性升高，SIRT2的磷酸化升高；应用GSK3beta抑制剂，可以显著抑制SIRT2磷酸化的升高。为了研究SIRT2对神经元存活的影响，我们在大脑皮层神经元中过表达SIRT2，结果表明SIRT2可以诱导神经元死亡，而过表达模拟磷酸化的SIRT2突变体，可以进一步促进神经元死亡，提示可能是SIRT2的过表达和磷酸化促进神经元的死亡。而在6-OH dopamine 诱导的神经元死亡中，细胞中转染SIRT2 shRNA可以使神经元死亡显著降低，进一步证明SIRT2促进6-OH dopamine 诱导的神经元死亡。为了检测在帕金森病模型中，SIRT2的磷酸化是否有改变，我们在MPTP诱导的的帕金森病小鼠模型中，检测了中脑黑质SIRT2磷酸化，发现在MPTP模型中SIRT2磷酸化增高。使用SIRT2抑制剂，可以减少MPTP导致的多巴胺能神经元死亡。.本课题采用小鼠MPTP帕金森病模型，研究参与帕金森病多巴胺能神经元死亡的磷酸激酶CDK5和GSK3 beta 对SIRT1和SIRT2活性的调节机制，及其活性改变对多巴胺能神经元存活的意义。