四神丸干预miRNA-200/ZEB信号调控免疫记忆性T细胞水平预防慢性溃疡性结肠炎复发的作用机制研究
批准号:
82060799
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
35.0 万元
负责人:
赵海梅
依托单位:
学科分类:
中西医结合临床基础
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
赵海梅
中文摘要
溃疡性结肠炎(UC)难治在于复发已为世人公认,而免疫记忆功能紊乱则是UC复发的重要特征之一,重塑其水平可有效治疗UC,且免疫记忆性T细胞功能受到miRNA-200/ZEB信号调控。我们的前期工作基础表明,四神丸(SSP)可防治UC复发,可能和调节慢性复发性溃疡性结肠炎小鼠免疫记忆性T细胞水平有关,但其调控的作用机制不明。遂提出SSP能通过miRNA-200/ZEB信号调控免疫记忆性T细胞水平预防UC复发的科学假设。于是我们采取miRNA200c基因敲入型小鼠复制慢性复发性UC小鼠,在验证SSP防治慢性UC复发同时,用流式细胞术检测免疫记忆性T细胞分类、亚群和功能等变化,并采用RT-qPCR检测miRNA-200/ZEB通路上核心蛋白表达,进而从miRNA-200/ZEB信号调节免疫记忆T细胞分化角度,明确SSP防治UC复发的可能机制,为中医药防治慢性疾病复发机制提供科学依据。
英文摘要
It is known that Ulcerative colitis (UC) is a refractory and relapse disease.It is an important character of UC which is including that the disbalance of memory T cell, which was controlled by miRNA-200/ZEB signaling pathway. It hints that remodeling memory T cells is an effective pathway to treat UC via miRNA-200/ZEB signaling pathway. In our previous study, Sishen Pill (SSP) prevented the relapse of UC, which was realized by regulating the memory T cell level in the DSS-induced colitis mice. So our scientific hypothesis is whether SSP prevents the relapse of UC by regulating memory T cell on miRNA-200/ZEB signaling pathway. In the present study, we will induce the relapsed colitis on H11-cag-miRNA200c transgenic mice by DSS, while we will verify the effectiveness of SSP prevented UC by pathological observation, and analyze the levels of memory T cell’ subgroup, function, and activation of miRNA-200/ZEB signaling pathway analyzed by RT-qPCR, flow cytometry, western blot and so on. All results will illuminate the mechanism of SSP prevented the relapse of UC by memory T cell on miRNA-200/ZEB signaling pathway. It will be an experimental and scientific evidence which the Traditional Chinese Medicine treated and prevented chronic disease.
溃疡性结肠炎(UC)难治在于复发已为世人公认,然免疫记忆功能紊乱是UC复发的重要特征之一,重塑其水平可有效治疗UC,且免疫记忆性T细胞功能受到miRNA-200/ZEB信号调控。我们的前期工作基础表明,四神丸(SSP)可防治UC复发,可能和调节慢性复发性溃疡性结肠炎小鼠免疫记忆性T细胞水平有关,但其调控的作用机制不明。遂提出SSP能通过miRNA-200/ZEB信号调控免疫记忆性T细胞水平预防UC复发的科学假设。在本研究中,经四神丸连续灌胃治疗后,小鼠体重逐渐上升,结肠长度恢复,结肠重量、肠重指数和单位结肠质量下降。小鼠结肠黏膜表面充血、水肿明显减轻,糜烂修复,炎细胞浸润明显减少。组织病理学评分显示小鼠结肠炎黏膜损伤明显修复。IL-9、IL-12促炎因子的表达水平下降,而IL-2等抑炎因子的表达水平显著升高,提示四神丸可以有效治疗小鼠慢性结肠炎。而小鼠脾脏中记忆性T细胞亚群分化均明显逆转,Tcm(含CD4+及CD8+型)、Tem(含CD4+及CD8+型)细胞水平均显著下降;mTreg细胞水平显著上调,伴mTh1、mTh2、mTh7及mTh17各亚群细胞水平均显著下降;Blimp-1+、TIGIT+、KLRG1+及T-Bet+标记的记忆性T细胞水平亦出现逆转,且miRNA-200a以及miRNA-200c明显上升,并显著下调ZEB1、ZEB2和snail蛋白含量;减少E-cadherin、Vimentin及TGF-β1蛋白表达。逆转记忆性T细胞促凋亡及抑制凋亡相关蛋白含量。提示四神丸能够调控记忆性T细胞miRNA-200/ZEB信号通路相关蛋白及细胞凋亡相关蛋白的表达。上述结果表明四神丸能有效治疗慢性溃疡性结肠炎,其作用机制或通过干预miRNA-200/ZEB信号通路调节记忆性T细胞分化来实现。
姜黄素干预BCL-6/Blimp-1信号调控Tfh细胞分化治疗溃疡性结肠炎的分子机制研究
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批准号:81760808
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项目类别:地区科学基金项目
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资助金额:33.0万元
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批准年份:2017
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负责人:赵海梅
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依托单位:
姜黄素干预JAK/STAT/SOCS信号通路对溃疡性结肠炎大鼠树突状细胞功能紊乱的调控作用
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批准号:81260595
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项目类别:地区科学基金项目
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资助金额:49.0万元
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批准年份:2012
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负责人:赵海梅
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依托单位:
国内基金
海外基金