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hUC-MSCs重编程为汗腺样细胞与多孔羊ADM复合培养制备功能性生物敷料的实验研究

批准号:
82060348
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
35.0 万元
负责人:
王凌峰
依托单位:
学科分类:
烧伤与冻伤
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
王凌峰

项目摘要

结项摘要

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中文摘要
大面积深度烧伤创面修复后,汗腺等附属器不能再生,皮肤丧失排汗功能,严重影响患者的生活质量。本研究通过皮肤组织工程技术联合汗腺样细胞,制备功能性生物敷料,移植覆盖创面,实现严重皮肤损伤的功能修复。脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)具有较强的增殖分化潜能,是理想的种子细胞。外胚叶发育不全蛋白基因(EDA)对汗腺的发育形成至关重要,本研究通过慢病毒转染,在hUC-MSCs中过表达EDA,重编程为汗腺样细胞,获得大量种子细胞。羊脱细胞真皮支架(ADM)作为组织再生的天然真皮基质的独特三维结构益于细胞增殖再生,将羊皮制成多孔三维结构的羊ADM,将汗腺样细胞与羊ADM复合培养,研究其与羊ADM复合最佳细胞数量,检测汗腺样细胞在ADM内的生长情况,将其应用修复裸鼠全层皮肤创面,检测汗腺样细胞在新生组织中的再生情况,探讨hUC-MSCs重编程为汗腺样细胞复合羊ADM敷料在修复皮肤附属器的作用机制。
英文摘要
With severe burn injury repaired, sweat glands can not be regenerated, loss of secretory function, greatly affects patient's quality of life. In this study, skin tissue engineering technique was used to combine sweat gland cell-like cells to make a functional biological dressing, cover the wound, achieved the functional reconstruction of skin.Umbilical cord mesenchymal stem cells (hUC - MSCs) have high potential for proliferation and differentiation, to be as a kind of ideal seed cells. Ectodysplasin (EDA) is very important in sweat gland development, then we construct lentiviruses overexpressed EDA,transfect it into hUC-MSCs, induces the reprogramming of hUC-MSCs into sweat gland-like cells, obtain a large number of seed cells. Acellular dermal matrix( ADM) of sheep is a dermal scaffold that retains the three-dimensional structure of normal collagen,which is benefit for cell proliferation. The sheepskin is made into a porous three dimensional sheep ADM, the sweat gland-like cells were combined with the sheep ADM, to test the appropriate number of cells and the growth state of sweat gland-like cells on the ADM, applying it to the full-thickness skin wound of nude mice, detecting sweat gland in the new tissue regeneration,to investigate the mechanism of hUC-MSCs reprogramming into sweat adenoid cells combined sheep ADM dressing in promoting skin function repaired.
大面积深度烧伤的修复十分困难,创面愈合后往往缺乏皮肤附属器,导致患者生活质量下降。研究如何重建汗腺成为组织修复领域的重点。本文探讨利用人脐血间充质干细胞(hUC-MSCs)诱导汗腺样细胞的高效方法,构建汗腺再生的治疗模型。EDA/EDAR/EDARADD信号通路被认为是汗腺发育的关键。通过慢病毒转染,成功过表达这些基因,激活相关信号通路,并在条件汗腺培养基中诱导细胞向汗腺分化。通过与羊皮(sADM)复合培养,研究了其在裸鼠创面模型中促进汗腺再生的效果。在动物实验中,在创面组织中早期观察到炎症反应相关因子IL-1β、TNF-α及生长因子VEGFA和PDGF的表达升高,促进了愈合过程。分析了创面愈合过程中的细胞因子、胶原蛋白(Col I和Col III)、层粘连蛋白、细胞凋亡标志物Bax和Bcl2,以及MMPs的表达情况,发现在创伤愈合早中期,它们的表达变化与创面修复密切相关。在EDAR-sADM组的3天和7天创面中,观察到与人类汗腺形态高度相似的组织团,这提示了汗腺再生的潜力。本研究表明EDA/EDAR/EDARADD基因过表达能有效诱导hUC-MSCs向汗腺样细胞分化,并为大面积深度烧伤后的创面修复提供了新的思路和方法。此成果为今后的临床治疗提供了理论基础,未来需进一步研究以验证其临床应用的可行性和有效性。
ADSCs转染GH和Tβ4复合微孔结构羊皮支架促进创面愈合的机制研究
  • 批准号:
    81660318
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    37.0万元
  • 批准年份:
    2016
  • 负责人:
    王凌峰
  • 依托单位:
iPS细胞分化的汗腺样细胞复合多孔结构羊皮支架促进创面愈合的机制研究
  • 批准号:
    81360293
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    49.0万元
  • 批准年份:
    2013
  • 负责人:
    王凌峰
  • 依托单位:
肝素化选择性脱细胞羊皮促进深二度烧伤创面愈合的实验研究
  • 批准号:
    81060154
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    24.0万元
  • 批准年份:
    2010
  • 负责人:
    王凌峰
  • 依托单位:
国内基金
海外基金