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乳酸菌引导β-伴大豆球蛋白“解构-重排”对致敏原表位胃肠道消化暴露行为的影响机制

批准号:
32072337
项目类别:
面上项目
资助金额:
58.0 万元
负责人:
芮昕
依托单位:
学科分类:
食品安全风险评估
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
芮昕

项目摘要

结项摘要

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中文摘要
β-伴大豆球蛋白是大豆中主要的致敏原,因其具有致密折叠的三维结构使大豆蛋白脱敏成为难点问题,且常规技术难以脱敏;乳酸菌发酵可特异性降低β-伴大豆球蛋白致敏性,但其脱敏机制尚不明晰,已成为乳酸菌发酵脱敏技术应用的重要障碍。本项目拟以前期筛选到的具显著β-伴大豆球蛋白脱敏效果的植物乳杆菌B1-6为发酵菌株,通过对致敏原表位精确定位,研究其对β-伴大豆球蛋白的“解构-重排”作用,明确结构变化对致敏原表位在胃肠道生理生化条件、消化道特有形态(空间效应)与消化道壁面运动(时间维度)下的暴露行为;建立完整的乳酸菌引导β-伴大豆球蛋白三维结构及空间构象变化与致敏性间的“构-效”关系,并在此基础上探讨植物乳杆菌B1-6对β-伴大豆球蛋白结构的变构机制,从三维结构和空间构象全局角度阐释乳酸菌发酵对β-伴大豆球蛋白的脱敏机制。本项目对于全面认知乳酸菌发酵与大豆蛋白致敏性的相互关系具有重要的理论价值和实践意义。
英文摘要
β-conglycinin is a major soybean allergen. Because of its compact three-dimensional structure, it is difficult to be desensitized by conventional techniques. Fermentation by lactic acid bacteria can specifically reduce the immunoreactivity of β-conglycinin, but the mechanism is not clear, which has become an important theoretical obstacle in the promotion of lactic fermentation desensitization technology. In this study, Lactobacillus plantarum B1-6, which had high desensitizing ability to β-conglycinin, will be used as fermentation strain. Through the precise location of allergen epitopes, the effect of "decomposition-rearrangement" of β-conglycinin induced by fermentation of L. plantarum B1-6 will be studied. Furthermore, the structural change induced exposure behavior alternation of allergen epitopes in gastrointestinal physiological and biochemical conditions, gastrointestinal specific morphology (spatial effect) and gastrointestinal wall movement (time dimension) will be determined. The study will establish the “structure-activity” relationship between the three-dimensional structure and spatial conformation of β-conglycinin and the immunoreactivity. The mechanism of L. plantarum B1-6 fermentation affecting the structure of β-conglycinin will be further discussed. This project aims to explain the desensitization mechanism from the role of lactic acid bacteria changing in perspective of three-dimensional structure and spatial conformation of β-conglycinin. This project will help to promote the comprehensive understanding of the relationship between lactic acid bacteria fermentation and soybean protein sensitization. It has important theoretical value and practical significance.
大豆蛋白由于具有较强的致敏性在近年来成为研究者和消费者关注的焦点问题。β-伴大豆球蛋白具有致密折叠的三维结构是制备低敏大豆中的重要靶点蛋白。本研究围绕乳酸菌发酵对β-伴大豆球蛋白的降敏机制,从蛋白结构变构、表位解析、胃肠道消化及“菌-蛋白”互作对致敏原表位及胃肠道表位暴露的影响等四方面开展系统深入研究。研究结果表明:1)、植物乳杆菌B1-6发酵显著降低β-伴大豆球蛋白致敏性并对结构产生“解构-重排”,发酵后蛋白内源荧光强度降低、表面疏水性升高,并引发了蛋白α-螺旋结构向β-折叠结构的转化。2)、采用多种免疫信息学方法对β-伴大豆球蛋白B、T细胞致敏原表位进行预测。β-伴大豆球蛋白α、α′和β亚基含IFLSIVDMNEGALLLP等潜在过敏原线性B细胞表位24个、NQRSPQ等过敏原构象B细胞表位34个、FETLFKNQYGRIRVL等T细胞表位共17个。3)、发酵β-伴大豆球蛋白在动态仿生胃肠道消化过程随消化空间效应与时间维度消化特性改变、消化物致敏性进一步下降。发酵特别促进了β-伴大豆球蛋白在十二指肠前、中期的结构瓦解,抗原性显著降低。4)、“菌-蛋白”作用机制的探究表明乳酸菌对β-伴大豆球蛋白一级结构与空间构象产生双重作用促进了β-伴大豆球蛋白N端与C端环域表位的特异性降解,提升了胃肠道消化中β-伴大豆球蛋白潜在强致敏表位的瓦解作用,其位于致密α-螺旋与β-折叠中的DLDIFLSSVDINEGALLLPHFNSK等20个表位中均呈现更高的降解频次。本项目建立完整的乳酸菌引导β-伴大豆球蛋白三维结构及空间构象变化与致敏性之间的“构-效”关系,明确了植物乳杆菌B1-6对β-伴大豆球蛋白结构的变构机制,填补了国内外相关领域的理论研究空缺。研究结果为乳酸菌发酵脱敏技术提供有效的理论和技术支持,对发展新型、营养、绿色、创新的大豆加工制品有重要的学术意义与理论指导作用。
乳酸菌发酵大豆蛋白柔性结构消化物调控小肠黏膜免疫耐受及降敏机制研究
  • 批准号:
    32372440
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    50万元
  • 批准年份:
    2023
  • 负责人:
    芮昕
  • 依托单位:
乳酸菌引导β-伴大豆球蛋白“解构-重排”对致敏原表位胃肠道消化暴露行为的影响机制
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    --
  • 资助金额:
    58万元
  • 批准年份:
    2020
  • 负责人:
    芮昕
  • 依托单位:
乳酸菌对β-伴大豆球蛋白降解规律及对过敏原性的影响机制
  • 批准号:
    31501466
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    20.0万元
  • 批准年份:
    2015
  • 负责人:
    芮昕
  • 依托单位:
国内基金
海外基金