环境敏感性荧光氨基酸在新型NPFF1和NPFF2高选择性配体的设计和合成中的应用

本项目根据最新的神经肽FF（NPFF）研究动向，并结合小分子荧光探针研究的最新进展，在已有的工作基础上开展了高效的NPFF系统荧光配体研究。此项目利用环境敏感性荧光氨基酸4-DAPA和3-ADCPA，化学构建并获得了高效的NPFF荧光配体。利用这些特异性荧光配体具有灵敏度高、背景噪音低等优点，我们将结合荧光检测技术来将这些荧光配体用于生物应用研究。并利用NPFF系统的高选择性配体为药理学工具，系统地研究了NPFF系统在痛觉调节、心血管活性和信号转导等方面的生物活性及其作用机制。研究结果表明：（1）鞘内注射NPFF及其相关肽可通过脊髓中NPFF1和NPFF2受体引起的升血压和升心率作用；（2）中枢NPFF1和NPFF2受体的激活都能介导抗外周吗啡镇痛的活性；（3）首次发现了NPFF和大麻系统之间的相互作用，以及NPFF系统对大麻中枢和外周镇痛活性的复杂调节作用；（4）NPFF受体激活能减弱脑中阿片依赖性的温水强迫游泳压力诱导的镇痛，但不影响非阿片依赖性的冷水强迫游泳压力所引起的镇痛活性；（5）在分化型神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中，NPFF激活ERK和NFκB等信号通路。此外，基于NPFF的高效配体，化学构建和筛选出了高效、低副作用的肽类全新配体，能有效降低吗啡等阿片类镇痛药的耐受和便秘等副作用，具有较好的应用前景。.本项目研究工作共发表SCI论文5篇，新申请国家发明专利2项，其中1项已获授权，项目负责人以第二完成人获2011年度甘肃省技术发明一等奖1项。在本项目进行过程中，共培养了具有独立工作能力的硕士研究生5名，4次参加各种国内外相关的学术会议，进行了较好的学术交流，工作受到好评。