我们圆满地完成了研究基金预定的各项任务。首先我们确定了血红素能够调节斑马鱼胰腺酶原基因的表达，并通过实验进一步阐明了其分子机制,为卟啉症的诊断和治疗提供新的参考。双色原位杂交实验结果显示斑马鱼的bach1b, nrf2a 和mafK基因均在胰腺中有表达。过表达和敲降实验表明nrf2a 作为正向调节因子能够激活胰腺酶原基因的表达，而bach1b作为负调节因子能够抑制胰腺酶原基因的表达。体外细胞转染实验证明了Bach1b/Nrf2a-MafK复合体通过与胰腺酶原基因中的MARE序列结合发挥调节作用。染色质免疫沉淀（ChIP）实验证明了正常情况下Nrf2a-MafK与MARE序列结合并激活下游胰腺酶原基因的表达，而在血红素缺失的情况下Bach1b-MafK与MARE结合并抑制胰腺酶原基因的表达。血红素通过改变正负调节因子与MARE的结合来实现对胰腺酶原基因表达的调控。这是首次阐明血红素对胰腺胰腺酶原基因表达的调控的崭新机制。其次我们通过高通量深度转录组测序技术对两种血红素缺失的斑马鱼突变体进行了不同发育时期的转录水平分析。与野生型对比结果显示，血红素合成缺陷的突变体在不同发育时期都有多种基因表达发生显著的变化，不同发育时期和不同突变体中差异表达的基因也有部分重叠。我们还运用TALEN和CRISPR/Cas9基因组修饰技术构建尚未有报道的血红素合成途径中的第二个(5-氨基酮戊酸脱水酶,ALAD）、第三个 (胆色素原脱氨酶, PBGD或羟甲基胆汁合酶HMBS)和第六个酶(粪卟啉原氧化酶,CPOX)缺失的斑马鱼突变体，并成功得到了相应基因的F0代突变体，为研究相应卟啉症的发病新机制奠定了坚实基础。