基于2DE-western blot技术筛选蛇毒毒素组C型凝集素蛋白新组分

C型凝集素蛋白（CLP）家族是蛇毒中共同存在的一个家族，因其具有与凝血因子X、IX，或者血小板膜糖蛋白GPIb-IV特异性结合，可以预防高凝状态或血管受损状态下血栓的形成，所以成为了心血管药物筛选的一个热点。针对该背景，本项目提出基于CLPs抗体的2DE＋western blot组合方法系统筛选蛇毒CLPs家族。蛇毒CLPs 的结构特征已经基本弄清，利用软件可以预测其可能的活性部位和抗原表位。以此设计共同抗原，制备多抗，可以用来特异性筛选蛇毒CLP蛋白。以前期分离的五步蛇CLP新组分Agacutegrin为抗原，制备多抗或直接使用单抗SZ-2进行对比实验。结合质谱、N端测序鉴定新CLPs组分，最后分离纯化各新CLP组分，进行活性测定和作用靶点分析。该项目研究策略靶向性较强，避免了对蛇毒全组分的排查，对于进行其他功能蛋白质组学研究有借鉴意义。