An improved reverse genetics system for mammalian orthoreoviruses.
An improved reverse genetics system for mammalian orthoreoviruses.
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DOI：
10.1016/j.virol.2009.11.037
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发表时间：
2010-03-15
期刊：
影响因子：
3.7
通讯作者：
Dermody, Terence S.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Kobayashi, Takeshi;Ooms, Laura S.;Ikizler, Mine;Chappell, James D.;Dermody, Terence S.
哺乳动物正呼肠孤病毒（呼肠孤病毒）是研究双链RNA病毒复制和发病机制的非常有用的模型。我们以前开发了一种策略，以恢复原型呼肠孤病毒株T3D从克隆的cDNA转染到小鼠L929成纤维细胞。在这里，我们报告了第二代呼肠孤病毒反向遗传学系统的开发，该系统具有几个主要改进：（1）拯救原型呼肠孤病毒株T1L的能力，（2）将所需质粒从10个减少到4个，以及（3）在转染表达噬菌体T7 RNA聚合酶的幼仓鼠肾细胞后分离重组病毒。与原始的10质粒系统相比，使用4质粒策略的病毒拯救效率显著增加。我们观察到T1L和T3D拯救载体在混合以产生一组T1L × T3D单重融合病毒时的完全相容性。呼肠孤病毒反向遗传学系统的改进增强了其用于呼肠孤病毒生物学研究和临床应用的适用性。
Mammalian orthoreoviruses (reoviruses) are highly useful models for studies of double-stranded RNA virus replication and pathogenesis. We previously developed a strategy to recover prototype reovirus strain T3D from cloned cDNAs transfected into murine L929 fibroblast cells. Here, we report the development of a second-generation reovirus reverse genetics system featuring several major improvements: (1) the capacity to rescue prototype reovirus strain T1L, (2) reduction of required plasmids from ten to four, and (3) isolation of recombinant viruses following transfection of baby hamster kidney cells engineered to express bacteriophage T7 RNA polymerase. The efficiency of virus rescue using the 4-plasmid strategy was substantially increased in comparison to the original 10-plasmid system. We observed full compatibility of T1L and T3D rescue vectors when intermixed to produce a panel of T1L × T3D monoreassortant viruses. Improvements to the reovirus reverse genetics system enhance its applicability for studies of reovirus biology and clinical use.
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影响因子：
6.7
作者：
Kirchner E;Guglielmi KM;Strauss HM;Dermody TS;Stehle T
通讯作者：
Stehle T
DOI：
10.1073/pnas.92.10.4477
发表时间：
1995-05-09
影响因子：
11.1
作者：
LAWSON, ND;STILLMAN, EA;ROSE, JK
通讯作者：
ROSE, JK
影响因子：
3.7
作者：
Ishii, K;Ueda, Y;Miyamura, T
通讯作者：
Miyamura, T
影响因子：
5.4
作者：
Kobayashi, Takeshi;Chappell, James D.;Dermody, Terence S.
通讯作者：
Dermody, Terence S.
影响因子：
5.4
作者：
Miller, CL;Parker, JSL;Nibert, ML
通讯作者：
Nibert, ML