Zeitaufgelöste Laser-Fluoreszenzmikroskopie zur Detektion intrazellulärer Parameter am Beispiel der Funktionsanalyse eines Insektenepithels

微生物学研究是一种非常有效的研究生物学系统的方法，通过微生物学研究来获得分子基础。这是一种新的、更广泛的建筑形式。FLIM的优势在于对非线性的测量，而非非线性的分子测量。多光子显微镜（MPM）通过产生光毒性来产生能量，因此它可以产生大量的光辐射和辐射。在这一系列的研究中，我们发现了一种新的方法，可以使生物学优化的方法变得更加有效。Außerdem sollen zusätzlich zum klassischen FLIM weitere spektroskopische Verfahren wie die Fluoreszenzkorrelationsskpektroskopie（FCS）für bildgebende Verfahren weiterentwickelt韦尔登。该方法的基本原理是韦尔登学方法，并在生物光谱分析中得到应用。MPM-FLIM方法是一个高度相关的生理学主题，即对美洲大蠊体内电解质和水输运的调节，它是一种韦尔登的生长和繁殖。因此，我们必须对韦尔登（O2，NO）产生的细胞内离子（H+，Cl-，Ca 2+）进行生理测量。在此基础上，解决了多参数检测和多焦显微镜建立韦尔登的问题。这韦尔登是一个商业化的mpm-FLIM测试，但也有合成新的mpm-FLIM测试，其特征在于基础是mpm-FLIM测试的基础。

Die Fluoreszenzmikroskopie ist eine vielseitige Methode zur Untersuchung von biologischen Systemen, von der makroskopischen bis zur molekularen Ebene. Dies spiegelt sich in der Etablierung zahlreicher neuer bildgebender Verfahren wider. Der Vorteil der Fluoreszenzlebenszeitmikroskopie (FLIM) liegt in der Messung der Fluoreszenzabklingzeit, die von der molekularen Umgebung des Farbstoffs abhängt. Die Multiphotonenmikroskopie (MPM) hingegen zeichnet sich durch geringe Phototoxizität, hohe räumliche Auflösung und größere Eindringtiefen aus. Ein Ziel dieses Vorhabens ist, diese beiden etablierten Verfahren miteinander zu kombinieren sowie den methodischen Zugang weiter zu entwickeln und speziell für biologische Anwendungen zu optimieren. Außerdem sollen zusätzlich zum klassischen FLIM weitere spektroskopische Verfahren wie die Fluoreszenzkorrelationsskpektroskopie (FCS) für bildgebende Verfahren weiterentwickelt werden. Die besonderen Vorteile der Methoden sollen gezielt ausgenutzt werden, um dadurch ein breiteres Spektrum biologischer Anwendungen zu erreichen. Die MPM-FLIM-Methode soll hierzu an einer konkreten physiologischen Thematik, der Regulation des Elektrolyt- und Wassertransports in den Speicheldrüsen der Schabe Periplaneta americana, angewandt und weiterentwickelt werden. Dazu sollen Messungen von physiologisch wichtigen intrazellulären Ionen (H+, Cl-, Ca2+) sowie von kleinen Biomolekülen (O2, NO) realisiert werden. Auf dieser Grundlage sollen zudem die Multiparameter-Detektion und die multifokale Mikroskopie etabliert werden. Es werden dazu einerseits kommerzielle Fluoreszenzfarbstoffe auf ihre Anwendbarkeit für MPM-FLIM getestet, aber auch die Synthese neuer Fluoreszenzfarbstoffe mit verbesserten Eigenschaften auf der Basis bestehender Farbstoffgrundgerüste angestrebt.