Factors that install activity and specificity in glycolipid biosynthesis pathways

这与糖基转移酶的特异性和糖脂的生物合成不同。调节剂中的糖基转移酶没有与脂质结合，因此，调节剂可用于调节Akzeptors的作用。我们已经在果蝇中鉴定了一种DHHC-ahnliches蛋白质，它具有一种非常好的功能。作为GABPI（für β4-NacetylGalactosaminylTransferaseB Pilot）的膜蛋白，对β 4 GalNAcTB的激活作用不明显。本研究通过对GABPI/β4GalNAcTB复合物的蛋白质、激活剂和亚细胞转运的诱变作用，研究了β4GalNAcTB、GABPI和脂质底物的相互作用。两个Ziel最好的研究是人GABPI同源物（DHHC 23）的分离和糖基转移酶的功能蛋白的研究。用β 4 GalNAcTB试剂盒检测半乳糖基转移酶（GalTs）恩格尔韦尔登。在毕赤酵母中建立了一个成熟的实验系统，用于表达韦尔登DHHC 23和半乳糖苷酶。Die Hefe synthetisiert als einziges Glucosyl-Ceramid，das Substrat für die Lactosyl-Ceramid bildenden GalTs. DHHC 23的遗传和特性在这一研究中有很大的不同，因此，在糖脂生物合成的过程中，抑制剂可以有效地调节糖脂的生物合成。

Es ist vollkommen unbekannt wie die Spezifität von Glykosyltransferasen, die an die Biosynthese von Glykolipiden beteiligt sind, hergestellt wird. Da Glycosyltransferasen in der Regel keine Lipidbindungsdomänen besitzen, wurde prognostiziert, dass Hilfsfaktoren die Erkennung des Akzeptors übernehmen. Wir haben kürzlich in Drosophila ein DHHC-ähnliches Protein identifiziert, welches für eine solche Funktion verantwortlich sein könnte. Das Membranprotein, als GABPI (für β4-NacetylGalactosaminylTransferaseB Pilot) bezeichnet, ist für die Aktivität von β4GalNAcTB unentbehrlich. In diesem Projekt sollen Wechselwirkungen zwischen β4GalNAcTB, GABPI und Lipidsubstraten molekular aufgeklärt werden, indem, nach Mutagenese beider Proteine, Aktivität und subzellulärer Transport des GABPI/β4GalNAcTB Komplexes analysiert werden. Ein zweites Ziel besteht in der Isolierung des humanen GABPI Homologs (DHHC23) und der Untersuchung der Rolle dieses Proteins für die Herstellung funktioneller Glycosyltransferasen. Studien werden dabei auf sechs Galactosyltransferasen (GalTs) mit enger Verwandtschaft zu β4GalNAcTB konzentriert. Um ein hintergrundfreies Experimentalsystem zu nutzen, werden DHHC23 und GalTs in Pichia pastoris exprimiert. Die Hefe synthetisiert als einziges Glykolipid Glucosyl-Ceramid, das Substrat für die Lactosyl-Ceramid bildenden GalTs. Schließlich ist die Herstellung und Charakterisierung DHHC23-difizienter Mäuse ein Ziel dieser Studie, deren Inhalt wesentlich zur Erweiterung der Kenntnis im Bereich der Glykolipid Biosynthese beitragen wird.