Enzymmarkierte DNA an elektrisch geheizten Elektroden

Neben der herkömmlichen optischen detection von Hybridisierungsvorgängen der Nukleinsäuren auf dna芯片werden seit <e:1> ber 10 Jahren auth verversprechende neuartige elekchemische Analysemethoden entwickelt, die sich als leistungsfähige, preiswerte und einfach zu handhabene alternative fenden Einsatz in Medizin und Forschung anbiet。in geplanten project soll die zeitaufwändige， teure and fehleranfällige聚合酶链反应（Polymerase-Kettenreaktion， PCR） zur Vervielfachung and damit zur Erhöhung der zestimenden dna - konconcentration durchine new hochemfinfinlich的检测方法ersetzt der zumindeest unterstellden。大足sollen酶markekierte DNA-Stränge和geheizten Elektroden zum insatz kommen。Die katalytische Wirkung des酶分子<e:1> ls erzeugt bei der elekchemischen检测große Mengen redoxaktiver Substanzen and fhrt daher zueiner um Größenordnungen höheren Empfindlichkeit als bei den herkömmlichen Redoxmarkern。Gewöhnliche酶标记物jdoch hitzeempfinlich和wrden die beeiner stringenten Hybridisierung auftretenden hohen温度夜vertragen。降解酶hitzebeständige （z.b.b aus thermoophilen Organismen）在高温下的活性研究。Erste Untersuchungen in unserer Gruppe mit geheizten Elektroden zeigten, pass sich die Hybridisierung der Nukleinsäuren and geheizten Elektroden stark beschleunigen lässt and damit eine erhebliche Verbesserung der hybridisierungsdetection möglich ist。【关键词】大豆；大豆；大豆；大豆；大豆；

Neben der herkömmlichen optischen Detektion von Hybridisierungsvorgängen der Nukleinsäuren auf DNA-Chips werden seit über 10 Jahren auch vielversprechende neuartige elektrochemische Analysemethoden entwickelt, die sich als leistungsfähige, preiswerte und einfach zu handhabende Alternativen für einen Einsatz in Medizin und Forschung anbieten. Im geplanten Projekt soll die zeitaufwändige, teure und fehleranfällige Polymerase-Kettenreaktion (PCR) zur Vervielfachung und damit zur Erhöhung der zu bestimmenden DNA-Konzentration durch eine neue hochempfindliche Detektionsmethode ersetzt oder zumindest unterstützt werden. Dazu sollen enzymmarkierte DNA-Stränge an geheizten Elektroden zum Einsatz kommen. Die katalytische Wirkung des Enzymmoleküls erzeugt bei der elektrochemischen Detektion große Mengen redoxaktiver Substanzen und führt daher zu einer um Größenordnungen höheren Empfindlichkeit als bei den herkömmlichen Redoxmarkern. Gewöhnliche Enzymmarker sind jedoch hitzeempfindlich und würden die bei einer stringenten Hybridisierung auftretenden hohen Temperaturen nicht vertragen. Alternativ in Frage kommende hitzebeständige Enzyme (z.B. aus thermophilen Organismen) sind jedoch erst bei hohen Temperaturen voll aktiv. Erste Untersuchungen in unserer Gruppe mit geheizten Elektroden zeigten, dass sich die Hybridisierung der Nukleinsäuren an geheizten Elektroden stark beschleunigen lässt und damit eine erhebliche Verbesserung der Hybridisierungsdetektion möglich ist. Daher sollen im geplanten Projekt geheizte Elektroden zur Durchführung und Detektierung der Hybridisierung sowie zu einer optimalen Einstellung der Elektrodentemperatur für eine maximale Aktivität des Enzymmarkers zum Einsatz kommen..