Präparation semi-synthetischer Proteine durch ein neuartiges trans-spleißendes Intein

如果你不相信这些多肽，你就会发现它们都不是最好的。我们已经在中性粒和手掌之间的联系，这是一个N-终端的TEIL AUSLEDGLICH 11 Aminosäuren的要求和手套的胃肠节相同步这些Präpariert是kann。Durch蛋白-反式-Spleiüen kann所以Ein合成的多肽化学和区域-末端Eines rekombinanten蛋白verknüPFT是。这是一种新的合成C-末端硫酯的方法，也是一种新型的生物合成方法。在我们的研究项目中，荧光共振能量转移(FRET)中的荧光共振能量转移(FRET)分析是一种有效的化学合成方法。从技术上讲，这是一种新型的多肽合成技术，在机械制造企业的多模块合成中发挥着重要的作用。我们在蛋白质中加入了一种新的蛋白质-反式-单链构象和方法。

Inteine knüpfen Peptidbindungen zwischen zwei beliebigen Polypeptiden, die als N- und C-Exteine mit der Inteindomäne fusioniert sind. Wir haben ein neuartiges gespaltenes Intein entwickelt, dessen N-terminaler Teil aus lediglich 11 Aminosäuren besteht und mittels Peptidfestphasensynthese präpariert werden kann. Durch Protein-trans-Spleißen kann so ein synthetisches Peptid chemo- und regioselektiv an den N-Terminus eines rekombinanten Protein verknüpft werden. Damit entfällt gegenüber herkömmlichen Methoden die Notwendigkeit zur Synthese eines C-terminalen Thioesters, Auf diese Weise werden funktionale chemisch-biologische Hybridverbindungen synthetisiert. In diesem Projekt sollen die Reaktionsbedingungen für das gespaltene Intein weiter optimiert, die Verträglichkeit verschiedener chemischer Funktionalitäten im synthetischen Peptid getestet und die Affinität zwischen den beiden Inteinteilen durch ein Fluorescence-resonance-energy-transfer (FRET)-Assay bestimmt werden. Ebenfalls mit FRET-Techniken sollen verschiedene Konformationszustände von nichtribosomalen Peptidsynthetasenfragmenten untersucht werden, um strukturelle und dynamische Einblicke in die Mechanismen dieser multimodularen Synthesemaschinen zu gewinnen. Die geeigneten Fluorophorsonden werden durch die neue Technik des Protein-trans-Spleißens und andere Methoden in die Proteine eingebaut.