Bispezifische Intra-diabodies gegen die Integrine avß3, avß1 und avß5 als Inhibitoren der Angiogenese

Wisenschaftliches Ziel dieses es，bifunktionelle，our valente intrantees für den phänotyischen Knokeout der Integrine？v？3，？v？？5，and？5？？1 herzustellen.Dazu是噬菌体展示规范和Hochaffine Antikörper gegen die Integrine？v？3，？v？？5，and？5？？1 selektiert，um Dann mittels Single-Chain Antikörper Fragmenten(ScFv)Bispezifische and Tetvalente Intra Abodes zu kLonieren.在过去的几年里，我们发现了蛋白质的存在。MIT Hilfe Dieser Intra abody-Konstrukte，die im Endoplants schen Retikulum(ER)zurückgehalten Wen den，soll die defktion der Integrine？v？3，？v？v？5，and？5？e？1 einzeln，Simtan and in verschiedenkombinationen gehemmt？Dadurch Sollen Einblicke in die Funktion Sowie Erkenntnisseüber die生理学和病理学：Dadurch Sollen Einblicke in die Funktion Sowie Erkenntnisseüber die生理学和病理学研究在传统上，Hind Herkömm lichen scFv Intrabody Bezüglich Halbwertszeit，Dauer des Funktionellen Knofting，Sowie der Möglichkeit des？Double Targeting？？berLegen。在这两个过程中，所有的技工都被淘汰出局，这是一种技术上的情况。So sollten Wisenschaftliche Aussagen Bezüglich Funktion，Rlevanz and Interaktion der Integrine？v？5，？v？3，and 5？1(整合素串音)möglich sein，and die diskrepanz der Ergebnisse zwitchen Integrin Knoockout Mäusen and den Ergebnissen die MIT Integrinheminmenden antikörpern erzielt Wurden，gekläRT we den können.Diskepant ist，dass Antikörper gegen？v？3 and？v？v？5 die Angigenese Block ieren，während hingegen Knokout Mäuse(？3-，？3/？5-)eine verstärkte Angigenese and Tumorwachstum zeigten.并对体内血管生成的功能和相互作用进行了体内评价。

Wissenschaftliches Ziel dieses Projekts ist es, bifunktionelle, tetravalente Intradiabodies für den phänotypischen Knockout der Integrine ¿vß3, ¿vß5, und ¿5ß1 herzustellen. Dazu werden mittels Phage-Display spezifische und hochaffine Antikörper gegen die Integrine ¿vß3, ¿vß5, und ¿5ß1 selektiert, um dann mittels single-chain Antikörper Fragmenten (scFv) bispezifische und tetravalente Intradiabodies zu klonieren. Intradiabodies können gezielt die Funktion eines Proteins ausschalten. Mit Hilfe dieser Intradiabody-Konstrukte, die im endoplasmatischen Retikulum (ER) zurückgehalten werden, soll die Funktion der Integrine ¿vß3, ¿vß5, und ¿5ß1 einzeln, simultan und in verschiedenen Kombinationen gehemmt werden. Dadurch sollen Einblicke in die Funktion sowie Erkenntnisse über die physiologische und pathologische Relevanz dieser Integrine in der Angiogenese gewonnen werden. Intradiabodies sind herkömmlichen scFv Intrabodies bezüglich Halbwertszeit, Dauer des funktionellen Knockouts, sowie der Möglichkeit des ¿double targeting¿ überlegen. Ausserdem erlauben sie in einem fortwährenden Prozess die regulatorischen Mechanismen der Zelle zu beobachten und zu analysieren, ohne die artifizielle Situation eines klassischen Knockouts, da das natürliche Gleichgewicht der Zelle nicht gestört wird. So sollten wissenschaftliche Aussagen bezüglich Funktion, Relevanz und Interaktion der Integrine ¿vß5, ¿vß3, und ¿5ß1 (Integrin crosstalk) möglich sein, und die Diskrepanz der Ergebnisse zwischen Integrin Knockout Mäusen und den Ergebnissen die mit Integrinhemmenden Antikörpern erzielt wurden, geklärt werden können. Diskrepant ist, dass Antikörper gegen ¿vß3 und ¿vß5 die Angiogenese blockieren, während hingegen Knockout Mäuse (ß3-, ß3/ß5-) eine verstärkte Angiogenese und Tumorwachstum zeigten. Um die Funktion/Interaktion der Integrine während der Angiogenese in vivo beurteilen zu können, werden die generierten und charakterisierten Intradiabodies an verschiedenen Tumormodellen auch umfassend in vivo evaluiert werden.