Transposonを利用した神経伝達に関与する遺伝子の単離と機能解明

シナプスでの化学伝達物質伝幡の制御機構を明らかにするためC.elegansコリン作動性ニュ-ロンを対象としてアセチルコリンの動態を制御する遺伝子検索、クロ-ニングを行い次のことが明らかになった。1.変異するとアセチルコリンが異常蓄積する7遺伝子を見出した。2.それらの遺伝子にトランスポゾンTclを挿入した。3.Tc1を用いて、7遺伝子の1つunc-18をクロ-ニングした。4.このクロ-ンを用い、多数のcDNAクロ-ンを得た。5.Northernによってunc-18がコ-ドするmRNAが3.6kbであると決定した。6.ゲノム及びcDNAクロ-ンの塩基配列を決定し、homology検索を行ったところ、過去に知られていない新しい遺伝子であることが明らかになった。更にunc-18遺伝子の性状を明らかにするため、この遺伝子の上流の調節領域について調べている。cDNAを発現系Vectorへ組み込み、大量の遺伝子産物の作成、それを用いた抗体作成を行っている。発生に伴う遺伝子発現をmRNAの消長及びin situ hybridizationによる細胞内局在を調べている。

シナプスでの化学伝達物質伝幡の制御機構を明らかにするためC.elegansコリン作動性ニュ-ロンを対象としてアセチルコリンの動態を制御する遺伝子検索、クロ-ニングを行い次のことが明らかになった。1.変異するとアセチルコリンが異常蓄積する7遺伝子を見出した。2.それらの遺伝子にトランスポゾンTclを挿入した。3.Tc1を用いて、7遺伝子の1つunc-18をクロ-ニングした。4.このクロ-ンを用い、多数のcDNAクロ-ンを得た。5.Northernによってunc-18がコ-ドするmRNAが3.6kbであると決定した。6.ゲノム及びcDNAクロ-ンの塩基配列を決定し、homology検索を行ったところ、過去に知られていない新しい遺伝子であることが明らかになった。更にunc-18遺伝子の性状を明らかにするため、この遺伝子の上流の調節領域について調べている。cDNAを発現系Vectorへ組み込み、大量の遺伝子産物の作成、それを用いた抗体作成を行っている。発生に伴う遺伝子発現をmRNAの消長及びin situ hybridizationによる細胞内局在を調べている。