脂肪細胞分化初期に発現が増加するRGS2およびTCL/TC10βLの機能解析

脂肪细胞分化早期表达增加的RGS2和TCL/TC10βL的功能分析

• 批准号: 16790060
• 负责人: 西塚 誠
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790060/
• 关键词: 脂肪細胞; 分化; TCL; TC10βL; 肥満; RGS2; Rho family; RGS family

肥満は糖尿病、高脂血症などの生活習慣病の主要な危険因子として深刻な問題である。しかし、脂肪細胞分化初期過程におけるメカニズムはほとんど解明されていない。昨年度、脂肪細胞分化初期に発現が増加する遺伝子として単離したRGS2とTCL/TC10βLについて、両因子の脂肪細胞分化初期過程における機能を明らかにするために、両因子と相互作用する因子群の検出、さらに両因子により発現が制御される因子群の同定を行った。本年度は、RGS2とTCL/TC10βLについて更に詳細な検討を行った。まず、TCL/TC10βLの恒常的活性変異体のFlag融合タンパク質を発現させた3T3-L1細胞を用いた免疫沈降により得られたTCL/TC10βLに特異的に相互作用すると思われる2つのバンドについて、質量分析計およびPMF法により、nonmuscle myosin heavy chain IIAとactinを同定した。また、TCL/TC10βLの恒常的活性変異体を3T3-L1細胞に導入すると、アクチンストレスファイバーが消失し、突起の形成が見られ、細胞骨格を大きく変化させることを明らかとした。また、TCL/TC10βLの活性型は、細胞膜においてnonmuscle myosin heavy chain IIAおよびactinと相互作用することを明らかにした。脂肪細胞分化の初期過程においては、大きな細胞形態の変化が観察されることから、TCL/TC10βLは、脂肪細胞分化の極めて初期において、細胞骨格を変化させることにより、脂肪細胞分化を制御している可能性が示唆された。さらに、RGS2と相互作用する因子として、Akt2、AKAP4、BIN3など7つのタンパク質を同定することができた。いずれの因子もこれまでRGS2との関連性について報告されておらず、脂肪細胞分化過程においてRGS2がこれまでに明らかになっていない新しい機能を有する可能性が示唆された。

The main risk factors of diabetes mellitus and hyperlipidemia are the profound problems. During the initial stage of adipocyte differentiation, the process of adipocyte differentiation is very complicated. In the past year, the expression of genes increased during the initial stage of adipocyte differentiation, RGS2 and TCL/TC10βL, and the function of factors during the initial stage of adipocyte differentiation were clearly defined. The interaction of factors and the expression of genes and the regulation of gene expression were also determined. This year, RGS2 TCL/TC10βL will be discussed in more detail. The constant activity of Flag fusion protein of TCL/TC 10 β L was detected by immunoprecipitation in 3T3-L1 cells. The specific interaction between TCL/TC10βL and actin was determined by mass spectrometry and PMF method. The constant activity of TCL/TC10 βL changed when introduced into 3T3-L1 cells. The active form of TCL/TC10βL is the interaction between nonmuscle-myosin heavy chain IIA and actin. In the early stage of adipocyte differentiation, cell morphological changes were observed. TCL/TC10βL showed the possibility of controlling adipocyte differentiation in the early stage of adipocyte differentiation. The interaction factors of RGS2, AKAP4, BIN3, AKAP 7, AKAP 8, AKAP 9, AKAP 9, AKAP The relationship between RGS2 and the factors involved in adipocyte differentiation is reported and the possibility that RGS2 may function in adipocyte differentiation is demonstrated.